动脉瘤性蛛网膜下腔出血神经行为、血细胞及血清蛋白谱的分析

发布时间：2019-11-27 12:35

【摘要】：[目的]探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血后神经行为、血细胞及血清蛋白的变化,探讨血细胞及血清蛋白的变化对动脉瘤蛛网膜下腔出血神经行为的影响,为动脉瘤性蛛网膜下腔出血疾病的防治及机理研究提供实验依据。[方法]收集2014年11月至2017年4月期间云南省昆明市第一人民医院神经外科确诊为动脉瘤性自发性蛛网膜下腔出血患者病例61例(男24例,女37例,年龄20-81岁,平均55.46±13.49岁)。对发病24h内入院的病人,采集其入院立即(病人未受任何干预治疗)的全血及血清,全血用于急诊血细胞分析,血清用于蛋白芯片分析,并在相应时间点对病人进行行为评分。按Hunt-Hess分级将入院立即的病人分为病情轻组和病情重组。将轻型患者与重型患者分别与正常人进行比较及重型患者与轻型患者进行比较,对各组血细胞数据进行t检验分析及血清蛋白的生物信息学分析。[结果](1)入院立即的血细胞分析显示:①病情轻组的病人发病后与正常人比较,血红蛋白、红细胞、白细胞、中性粒细胞%、中性粒细胞数均呈上升趋势,差异有统计学意义(p0.05)。淋巴细胞%、单核细胞%、淋巴细胞数、单核细胞数均呈下降趋势,差异均有显著统计学意义(p0.01)。血小板比较,无统计学差异(p0.05)。②病情重组的病人发病后与正常人比较,红血蛋白、红细胞、白细胞、中性粒细胞%、中性粒细胞数均呈上升趋势、且差异均有显著统计学意义(p0.01)。淋巴细胞%、单核细胞%,淋巴细胞数均呈下降趋势,差异均有显著统计学意义(p0.01)。血小板和单核细胞数比较,无统计学差异(p0.05)。③病情重组的白细胞、中性粒细胞数及单核细胞数均高于病情轻组的病人,差异有显著统计学意义(p0.01)。红血蛋白、红细胞、中性粒细胞%、单核细胞%、淋巴细胞数、血小板及淋巴细胞%比较,差异无统计学意义(p0.05)。(2)入院立即的血清蛋白芯片分析显示:①轻型患者与正常人的血清蛋白芯片比较,发现轻型患者发病后,有113个血清蛋白发生上调,其中排名前十的蛋白分别是ROS、RYK、S100A10、uPA、EphB2、LTK、EphA5、CathepsinB、EphA8 和 Desmin;352个血清蛋白发生下调,其前十名分别是Pro-BDNF、IL-36RN、FetuinB、NM23-H1/H2、PAK7、TFF3、HTRA2、CD36、MCP-4/CCL13 和 ActivinRⅡA。②重型患者与正常人的血清蛋白芯片比较,发现重型患者发病后有130个血清蛋白发生上调,前十的蛋白分别是BAFFR/TNFRSF13C、EN-RAGE、IGFBP-5、BLAME、FGFR2、IL-1F8/FIL1eta、SCG3、MMP-9、Kallikrein7 和 Btk;192个血清蛋白发生下调,前十名分别是OX40、HTRA2、CCR7、M-CSF、IL-23R、ActivinRIB/ALK-4、IGFBP-6、IL-1ra、MFRP 和 IL-17C。③重型患者相比轻型患者,有248个血清蛋白发生上调,前十的蛋白分别是FetuinB、IL-36RN、NM23-H1/H2、CD36、CPN2、VWF、DCBLD2、Follistatin-like1、Btk、FER;112个血清蛋白发生下调,前十名分别是ROS、CD74、Desmin、RYK、LTK、pro-Glucagon、uPA、CathepsinB、EphB2 和 EphA8。④通过分别将三组蛋白芯片比较按照差异倍数筛选出的上下调前十名蛋白放进String网站上搜索蛋白间相互作用及三组蛋白芯片分析结果互相取交集,我们发现轻型患者与正常人相比,FetuinB、IL-36RN、NM23-H1/H2 及 CD36 明显下调,ROS、RYK、uPA、EphB2、LTK、CathepsinB、EphA8和Desmin明显上调,且与重型患者相比结果一致,但重型患者相比正常人,FetuinB和uPA表达上调,IL-36RN、NM23-H1/H2、CD36、ROS、RYK、EphB2、LTK、CathepsinB、EphA8 和 Desmin均无明显变化。重型患者与正常人相比,Btk蛋白显著上调,且与轻型患者相比依旧明显上调,但轻型患者与正常人比较无明显变化。且EphB2和RYK有直接作用关系。[结论](1)发生aSAH时,神经行为会发生改变,轻者伴神经受累,出现脑膜刺激征,重者出现神经障碍、意识的障碍和脑膜刺激征,甚至会出现偏瘫。还会带来神经功能的损害,如认知功能受损,尤其是执行功能,语言和空间记忆等。(2)aSAH发病后,血红蛋白,红细胞,白细胞,中性粒细胞%,中性粒细胞数均增多,淋巴细胞%,单核细胞%,淋巴细胞数,单核细胞数均减少,且其中,白细胞,中性粒细胞数和单核细胞数与神经行为有关,病情越重,其数量越多,炎症反应越强烈,神经功能受损越严重。(3)aSAH发病后,会使得多种蛋白发生变化,这是一个复杂调节的过程。且其中,与缺血缺氧、免疫炎症、细胞凋亡或生长、血管受损或修复、神经功能等有关的蛋白质变化最明显。这些蛋白的表达变化可能与病情的严重程度有关也可能是疾病的潜在发病机制,还有待进一步研究。(4)发生aSAH时,产生的出血性及创伤性急性应激炎症反应对血管造成损伤,进一步引起局部缺血缺氧,从而对神经功能造成一定损害。其炎症反应越重,病情也越严重,其神经功能损害也越严重,并且他们之间是相互促进的关系。
【图文】：

颅内动脉瘤,蛛网膜下腔出血

颅内动脉瘤图

步骤,洗液,玻片,芯片分析

４）抽去ｌｘ洗液丨，加入ｌｘ洗液丨Ｉ室温振荡，洗玻片３次，每次５）抽去ｌｘ洗液丨丨，每孔加入４０0ｎＬ用封闭液１５００稀释的Ｃｙ３邋ｅｑ避光振荡孵育２小时。逡逑６）按照步骤３）和４）洗玻片。逡逑３．邋４．邋５荧光检测逡逑采用激光扫描仪例如ＩｎｎｏＳｃａｎ邋３００扫描信号，采用Ｃｙ３或者发频率＝５３２ｎｍ）逡逑１）扫描仪器：丨ｎｎｏＳｃａｎ邋３００邋Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ邋Ｓｃａｎｎｅｒ逡逑２）产地：Ｐａｒｃ邋ｄ＇Ａｃｔｉｖｉｔｙ邋Ａｃｔｉｖｅｓｔｒｅ邋；邋３１邋３９０邋Ｃａｒｂｏｎｎｅ邋－邋Ｆｒａｎｃｅ逡逑３）扫描参数：ＷａｖｅＬｅｎｇｈ：邋５３２ｎｍ；邋ｒｅｓｏＬｕｔｉｏｎ：邋１０ｐｍ逡逑采用芯片分析软件提取数据，，采用（ＡＡＨ－ＢＬＧ－１０００）的数据分析软分析。逡逑
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R743.35

【参考文献】