外周循环中的Tfh细胞和Tfr细胞在帕金森病发病机制中的研究

发布时间：2020-03-31 09:19

【摘要】：目的:通过研究帕金森病患者外周循环中的Tfh细胞与Tfr细胞的表达,及外周血中相关的IL-4、IL-10、IL-21和TGF-β的表达水平,探讨Tfh细胞与Tfr细胞在帕金森病发生发展中的作用。方法:选取了2017年1月至2018年1月在吉林大学第一医院神经内科门诊及住院治疗的PD患者40例,同时选取年龄、性别相匹配的健康对照者30例。在受试者知情同意的情况下,晨起空腹采集外周静脉血。肝素抗凝血用于流式细胞仪检测外周血中Tfh细胞及Tfr细胞占CD4+T细胞的比例;促凝血离心后用于流式液相多重蛋白定量技术检测外周血血清中IL-4、IL-10、IL-21及TGF-β的水平。同时采集患者的基本信息和临床资料,包括性别、年龄、病程等,帕金森病专科医生对PD患者进行H-Y分期、UPDRS-III评分及NMSS评分。最后,比较PD组患者和HC组的外周血中Tfh细胞与Tfr细胞的表达水平,及两组间IL-4、IL-10、IL-21和TGF-β的水平差异。结果:1、与HC组相比,PD组患者外周循环中的Tfh细胞占CD4+T细胞的比例明显升高[3.68(2.64-5.70)vs 1.94(1.32-2.99),P0.001],差异具有统计学意义。2、与HC组相比,PD组患者外周循环中的Tfr细胞占CD4+T细胞的比例降低,但无统计学差异[1.05(0.62-1.54)vs 1.3(0.63-1.90),P0.05]。3、与HC组相比,PD组患者外周循环中的CD19+B细胞占淋巴细胞的比例明显降低,差异具有统计学意义[5.35(4.13-9.38)vs 8.68(5.61-12.93),P=0.014]。4、PD组患者与HC组相比,外周血中细胞因子的水平IL-4、IL-10、IL-21及TGF-β的水平均未发现明显差异(P0.05);但PD组患者外周血中的IL-21水平与H-Y分期及UPDRS-III评分呈正相关(P0.05)。结论:1、与HC组相比,PD组患者外周循环中的Tfh细胞表达明显增加,Tfr细胞的表达虽无统计学差异,但具有下降的趋势。这提示PD患者可能存在持续激活的体液免疫反应,推测可能与PD的慢性持续性进展有关,有可能成为干预PD疾病的新靶点。2、IL-21的水平与PD组患者的H-Y分期和UPDRS-III评分呈正相关,这提示IL-21可能用来评估疾病的严重程度。
【图文】：

图 3.1 Tfh 细胞、Tfr 细胞和 B 细胞的流式图（2）流式液相多重蛋白定量技术（CBA）检测外周血中 IL-4 、IL-10、IL-21及 TGF-β 的水平的步骤说明：可能各种细胞因子的检测方法不完全相同，严格按照试剂盒说明书操作，下面以 IL-4、IL-10 及 IL-21 试剂盒为例，介绍 CBA 法检测血清中细胞因子含量的步骤。①标准品的制备a 用 4ml 的稀释液稀释标准品，用移液枪轻轻混匀后室温静置 15 分钟，标记为 Top Standard 管；b 按顺序标记 12×75mm 流式管，1:2 倍稀释，1:4 倍稀释，1:8 倍稀释，1:16倍稀释，，1:32 倍稀释，1:64 倍稀释，1:128 倍稀释，1:256 倍稀释，共 8管；

图 3.2 IL-21 的 CBA 法标准曲线（横坐标代表浓度 pg/ml，纵坐标代表平均荧光强度）3.4 统计学方法实验数据采用 SPSS 22.0 统计软件进行分析，对计量资料进行正态性检验，符合正态分布的，以均数±标准差表示，进行两独立样本 t 检验；不符合正态分布的，用中位数（四分位数间距）表示，进行 Mann-Whitney u 检验；变量之间采用 Spearman 进行相关性分析，P<0.05 认为具有统计学差异。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R742.5

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本文编号：2608883