Rho激酶抑制剂对脑出血大鼠脑保护作用的机制研究

发布时间：2020-04-09 02:52

【摘要】：目的:探讨Rho激酶抑制剂对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠脑保护的作用及其机制。方法:120只健康成年雄性Sprague-Dawlay(SD)大鼠随机分为3组:假手术组(Sham)、脑出血组(ICH)、干预组。其中干预组再分为低剂量法舒地尔干预组(LD)和高剂量盐酸法舒地尔干预组(HD)两个亚组。脑出血组和干预组采用非抗凝自体血立体定向注射法建立脑出血动物模型,假手术组仅用微量注射器刺入右侧尾状核。假手术组及脑出血组于造模完成后30min经腹腔注射2ml生理盐水此后每24小时给药一次,干预组于造模完成后30min经腹腔分别注射盐酸法舒地尔l0mg/kg(LD)、30mg/kg(HD),此后每24小时给药一次。分别于相应时间点断头取脑,HE染色观察血肿形成及血肿周围组织炎性细胞浸润情况,并用干湿重法检测脑组织含水量,采用ELISA法检测脑组织IL-6、TNF-α水平,Western blot 法检测血肿周围组织 ROCK2、MYPT-1、P-MYPT-1、Bcl-2、Bax、AQP-4蛋白表达水平。结果:1.大鼠脑出血后12h、1d、3d血肿周围组织ROCK2蛋白表达与假手术组相比明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。大鼠脑出血后12h、ld、3d、5d、7d脑组织含水量、IL-6、TNF-α相对含量明显增高,与假手术组相比差异具有统计学意义(P0.05)。大鼠脑出血后12h、1d、3d、5d、7d血肿周围组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达与假手术组相比明显增高,差异具有统计学意义(P0.05)。2.干预组12h、1d、3d血肿周围组织ROCK2蛋白表达与ICH组相比明显减少,差异具有统计学意义(P0.05)。造模后12h高剂量盐酸法舒地尔干预组(HD)血肿周围组织ROCK2蛋白表达与低剂量盐酸法舒地尔干预组(LD)相比明显减少,差异具有统计学意义(P0.05)。干预组之间造模后1d、3d血肿周围组织ROCK2蛋白表达无明显差异。3.脑出血后MYPT-1磷酸化水平与假手术组相比明显增高并且随着时间变化逐渐减少,干预组MYPT-1磷酸化水平与脑出血组相比明显减少。并且高剂量盐酸法舒地尔干预组(HD)作用更为明显。4.干预组凋亡相关蛋白Bcl-2表达与脑出血组相比明显增加,Bax蛋白表达明显减少。干预组AQP-4蛋白表达与脑出血组(12h)相比明显减少。结论:盐酸法舒地尔可通过减少血肿周围脑组织ROCK2的表达及抑制其功能来减轻ICH后脑水肿,抑制炎症因子分泌及细胞凋亡来发挥神经功能保护作用。
【图文】：

脑出血后１２ｈ血肿周围脑组织ＲＯＣＫ－２蛋白表达开始升高，并于丨、３天维逡逑持较高水平，，与假手术组相比差异具有统计学意义，脑出血后５ｄ、７ｄ血肿周围逡逑脑组织ＲＯＣＫ－２蛋白与假手术组相比差异无统计学意义（见图２邋）逡逑２１逡逑

逦ｉ邋＊邋Ｊ逡逑＾逡逑图２．２．２：血肿周围组织各时间点ＲＯＣＫ－２蛋白表达量，与假手术组相比，＊尸＜０．０５。逡逑２．３．３血肿周围组织各时间点Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｇａｓｐａｓｅ－３蛋白逡逑表达逡逑脑出血组各时间点血肿周围组织Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｃａｓｐａｓｅ－３表达随时间延长呈逡逑动态变化，其中Ｂｃｌ－２于３ｄ达高峰。Ｂａｘ、Ｃａｓｐａｓｅ－３于出血后１２ｈ开始增高，逡逑此后维持在较高水平。与假手术组相比较，脑出血后Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｃａｓｐａｓｅ－３表逡逑达水平明显增高，差异有统计学意义（Ｐ＜0．0５）（见图３）。逡逑２．５－．逦＊逡逑ｂ邋ｂ邋ｂ邋ｂ邋２．０－逦＊邋＊邋工邋＊邋＊逡逑丁逦丁邋Ｉ逡逑Ｃａｓｐａｓｅ－３逦ｍｍｍ邋ｍｍｍ逦＾邋１邋ｇ逦厂＾逦［逡逑ＢＡＸ逦■丁一邋ｍｍｍ邋ｍｍｍ邋ｍｍｔｍ逦ｍ邋１邋ｒｉ＿邋－？￣逡逑逦逦邋ｍｍｍｍｍ逡逑．．．．．．－．．．．？－逦0５逡逑ｄ．邋ａｇＢａＳＫ＾ＳＢＳａｉＳ＾ＳＳｆｌＭａｉＢａＭＭＭ——．．

本文编号：2620184