MicroRNA-26a通过死亡相关蛋白激酶1介导帕金森病突触核蛋白病变与多巴胺神经元退变

发布时间：2020-04-12 00:35

【摘要】：【背景】死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)是一种分布广泛的丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)激酶,参与阿尔茨海默病和脑卒中发生发展,但DAPK1在帕金森病发病过程中的作用和机制仍不清楚。【目的】探究DAPK1在神经退行性疾病帕金森病发病中的作用和分子机理。【方法】注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导帕金森病模型小鼠。采用蛋白免疫印迹法、免疫组化等方法观察DAPK1和其他蛋白的变化。用Q-PCR和FISH分析相关miRNA的表达。采用转棒、旷场和爬杆行为学实验来评价运动能力。采用免疫荧光法、免疫印迹法和filter trap评价突触核蛋白病变。注射相关病毒在体内调控DAPK1的表达。采用转基因小鼠杂交得到多巴胺神经元特异性敲除DAPK1小鼠。采用多肽探索治疗新策略。【结果】我们研究发现,帕金森病模型小鼠中DAPK1上调。C/EBPα转录因子缺失导致的miR-26a的下调,导致DAPK1转录后水平上调。帕金森病模型小鼠中DAPK1上调与神经元突触核蛋白病变呈正相关。miR-26a的下调或者DAPK1的上调可以导致野生型小鼠出现突触核蛋白病变、多巴胺神经元丢失和运动障碍。与此相反,通过将DAT-cre小鼠与DAPK1-KD~(loxp/loxp)小鼠杂交,在多巴胺神经元中敲除DAPK1,可以有效地改善慢性MPTP模型小鼠的症状。我们进一步研究发现DAPK1通过直接磷酸化α-synuclein的Ser129位点诱导帕金森样表型。与此相一致的是在MPTP模型小鼠中使用一种细胞膜通透的竞争性多肽阻断α-synuclein的磷酸化,可以改善突触核蛋白病变、多巴胺神经元丢失和运动障碍。【结论】miR-26a/DAPK1信号通路在帕金森病的分子和细胞病理过程中有重要作用。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R742.5

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