人巨细胞病毒感染促进TOP2A在胶质瘤中高表达

发布时间：2020-04-12 00:37

【摘要】：目的:许多研究表明人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)与胶质瘤的恶性发展密切相关,如影响细胞周期、抑制细胞凋亡、促进血管生成和帮助细胞免疫逃避等。近年来研究显示参与DNA拓扑空间结构相互转换的核酶拓扑异构酶2A(TOP2A)在许多恶性肿瘤中高表达,有望成为肿瘤预后的新型分子标志物。但尚未见关于HCMV感染与TOP2A表达的相关研究。本研究通过检测IE1和TOP2A在胶质瘤中的表达,研究胶质瘤HCMV感染与TOP2A表达的关系。方法:在Oncomine数据库平台,利用其在线分析工具荟萃分析了6个不同数据集中胶质瘤样本与正常组织对照样本中TOP2A的表达水平。PrognoScan数据库分析GSE4271 77例胶质瘤样本和GSE4412 74例胶质瘤样本,预测TOP2A的表达情况与胶质瘤生存预后的关系。收集并分析胶质瘤组织石蜡标本58例。采用免疫组织化学方法检测样本中TOP2A蛋白和HCMV IE1蛋白的表达情况,并分析HCMV感染和TOP2A表达的相关性。以HCMV感染人胶质瘤U87细胞为实验组,未感染HCMV U87细胞对照组、HCMV+800μmol/L更昔洛韦(GCV)阴性对照组。应用蛋白质印迹法(Western Blot)的方法检测IE1和TOP2A蛋白的表达。取HCMV感染后的U87细胞为实验组,未感染HCMV的U87对照组,异种移植两组细胞于B-NSG重度免疫缺陷鼠,每组4只。成瘤后采用免疫组化检测IE1和TOP2A蛋白的表达。结果:在Oncomine数据库平台荟萃分析853例胶质瘤样本和52例正常脑组织样本显示,TOP2A在胶质瘤组中明显高表达(P=3.14í10~(-6),中位数=126)。PrognoScan数据库平台分析GSE4271 77例胶质瘤样本示:TOP2A高表达与胶质瘤死亡事件负相关[P=0.002735,HR=1.41(1.13-1.76)]。分析GSE4412 74例胶质瘤样本示TOP2A高表达与胶质瘤死亡事件负相关[P=0.009506,HR=1.37(1.08-1.73)]。胶质瘤石蜡样本免疫组化结果显示:与瘤旁免疫组织对比,胶质瘤中TOP2A明显高表达(P0.0001,t=4.578);TOP2A的表达情况与患者的肿瘤分级相关(P0.0001,F=11.91)。在所有胶质瘤样本中,IE1阳性率(56/58,98%),IE1低表达组(28/58,48%),IE1高表达(30/58,62%)。IE1低表达组与IE1高表达组对照显示:TOP2A在IE1高表达组明显高表达(P0.0001,t=4.479)。Western blot结果均表明:与未感染HCMV和HCMV感染+800μmol/L GCV双阴性对照组相比,MOI=2感染U87细胞48h后TOP2A蛋白明显高表达(P=0.0068,t=4.436)。肿瘤异种移植实验显示:HCMV感染组U87细胞成瘤速度快于HCMV阴性组U87细胞(P0.0001,t=2.430)。成瘤31天后,HCMV感染组瘤体重量高于HCMV阴性组(P=0.0133,t=5.265)。瘤体组织免疫组化显示:在HCMV感染组中TOP2A明显高于HCMV阴性组(P0.0001,t=5.447)。结论:与正常脑组织相比,胶质瘤组织中TOP2A高表达,并可能与胶质瘤的肿瘤生存预后有关。HCMV感染胶质瘤后能促进TOP2A高表达,进而促进胶质瘤恶性进展。
【图文】：

（P=2.59 10-13，t=30.6，图3.1b）。另外在Sun L等人的数据芯片中显示TOP2A的表达高于正常脑组织 102.5 倍（P=2.37 10-27，t=18.62，图 3.1c）。Table 3.1 在 Oncomine 数据库平台 meta 分析 6 个不同数据集 TOP2A 基因的表达情况数据集 (样本总数) 胶质瘤与正常对照（样本数） 差异倍数 P 值高表达基因Gene RankSun Brain(150)胶质母细胞瘤 81 vs. 正常对照 23 102.54 2.37 10-2722 (in top1%)少突胶质细胞 50 vs. 正常对照 23 28.44 8.4 10-1827 (in top1%)间变性星形细胞瘤19 vs正常对照23 34.64 4.10 10-1238 (in top1%)Liang Brain (33) 胶质母细胞瘤 31 vs 正常对照 2 2.20 6.27 10-6115 (in top2%)TCGA Brain (552) 胶质母细胞瘤 542 vs 正常对照 10 28.90 2.59 10-13137 (in top2%)French Brain (29) 间变性少突胶质瘤 23 vs 正常对照 6 9.68 1.15 10-8145 (in top1%)Shai Brain (34) 胶质母细胞瘤 27 vs 脑白质 7 2.29 1.17 10-6227 (in top3%)Murat Brain (84) 胶质母细胞瘤 80 vs. 正常对照 4 13.76 2

PrognoScan数据库平台生成胶质瘤病人TOP2AmRNAKaplanMeier生存曲线
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R739.41

【参考文献】

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本文编号：2624047