星形胶质细胞对髓母细胞瘤放、化疗损伤保护作用的研究

发布时间：2020-05-01 02:32

【摘要】：目的:髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)是一种起源于原始神经外胚层的后颅窝恶性肿瘤,是最常见的儿童中枢神经系统肿瘤。主要发生于小脑下蚓部,常发生经脑脊液的播散转移。髓母细胞瘤的治疗主要是手术辅以放疗和化疗,但是,手术不易完整切除,放疗和化疗也具有严重毒副作用,对患儿造成不同程度的智商下降及认知能力障碍、听力损害、内分泌紊乱、神经系统发育障碍、生长发育迟缓、继发肿瘤、心肺毒性及生殖毒性等。使患儿的正常生长发育及生活质量受到严重影响。降低放疗和化疗剂量又难以控制肿瘤细胞甚至引发治疗抵抗及复发问题。很多研究提出了许多策略来克服肿瘤细胞的放疗和化疗抗性,但是对肿瘤微环境介导的耐药机制以及如何规避关注的较少。随着肿瘤分子生物学技术的不断发展和在分子水平上对于肿瘤发病机制认识的不断加深,肿瘤微环境是肿瘤发生、进展和转移的生物学关键。星形胶质细胞是一种特殊的神经胶质细胞,在脑中广泛分布,向神经元提供能量代谢物,以及维持细胞外离子和神经递质的稳态,在微循环中起重要作用,也是髓母细胞瘤微环境的重要组成细胞。此外,星形胶质细胞释放大量的生长因子和细胞因子,可能为肿瘤的生长和转移提供一个支持性的微环境。有研究证明星形胶质细胞对SHH型髓母细胞瘤的发生及发展起不可或缺的作用,这突出了星形胶质细胞在髓母细胞瘤微环境中的重要性。但就目前而言,星形胶质细胞对髓母细胞瘤的放疗和化疗过程中的影响尚缺少研究。因此,本课题旨在通过研究星形胶质细胞这一髓母细胞瘤肿瘤微环境中的重要组分,对髓母细胞瘤放疗和化疗损伤的影响,为髓母细胞瘤的临床治疗及耐药研究提供新的思路。方法:提取原代髓母细胞瘤细胞和星形胶质细胞,将星形胶质细胞与髓母细胞瘤以1:10的浓度在体外共同培养模拟肿瘤微环境条件。经过放疗或化疗处理后,对比单独培养和共同培养的髓母细胞瘤细胞生存状态差异,研究星形胶质细胞对髓母细胞瘤放疗和化疗损伤的影响。通过对比研究单独培养和与星形胶质细胞共同培养的髓母细胞瘤在放疗和化疗过程中,增殖能力、凋亡水平及DNA损伤程度的差异,探究星形胶质细胞对髓母细胞瘤放疗和化疗损伤保护作用的机制。结果:我们的结果显示1.单独培养的髓母细胞瘤在1Gy放疗的情况下大量死亡,而和星形胶质细胞共培养的髓母细胞瘤大量存活;在2μM顺铂化疗的情况下,单独培养的髓母细胞瘤大量死亡,共培养的髓母细胞瘤仅少数细胞死亡。2.通过对DNA损伤特异性抗体γH2AX及细胞凋亡特异性抗体Cleaved-caspase3的标记,发现与星形胶质细胞共培养的髓母细胞瘤在1Gy放疗的情况下DNA损伤程度及凋亡水平均比单独培养的髓母细胞瘤低;在2μM顺铂化疗的情况下,单独培养的髓母细胞瘤DNA损伤程度及凋亡水平比共培养的髓母细胞瘤高。证明与星形胶质细胞共同培养,可以提高髓母细胞瘤对DNA损伤的抵抗,从而降低其在放疗和化疗中的凋亡水平。3.运用q PCR定量分析,发现与星形胶质细胞共同培养的髓母细胞瘤在1Gy放疗或2μM顺铂化疗的情况下,干扰素相关DNA损伤抵抗基因(Interferon-Related DNA Damage Resistance Signature,IRDS)表达明显比单独培养的髓母细胞瘤高。结论:星形胶质细胞对髓母细胞瘤放疗和化疗损伤有保护作用。在髓母细胞瘤放疗和化疗过程中,星形胶质细胞通过提高髓母细胞瘤对DNA损伤的抵抗,降低了髓母细胞瘤的凋亡水平。进一步研究发现,星形胶质细胞对髓母细胞瘤放疗和化疗损伤的保护作用,可能与提高髓母细胞瘤干扰素相关DNA损伤抵抗基因(IRDS)的表达有关。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R739.4

【参考文献】