CDC42在大鼠缺血再灌注损伤脑组织中的表达研究

发布时间：2020-05-30 10:51

【摘要】：目的:观察细胞分裂周期蛋白42(Cell division cycle42,CDC42)在大鼠脑缺血再灌注后的表达情况,同时探讨CDC42特异性抑制剂ML141对大鼠神经功能缺损及脑组织梗死体积的影响。方法:随机将雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠分为以下九组:缺血再灌注模型组(5组:再灌注6 h、24 h、72 h、1 w、2 w)、正常组、假手术组、ML141组及DMSO组,采用大脑中动脉阻塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立脑缺血再灌注模型,通过改良的Zea-Longa评分法评估大鼠的神经功能缺损程度,用Western blot测定CDC42的表达情况,用免疫组织化学染色技术测定CDC42的表达部位情况,HE染色观察脑缺血再灌注损伤后的病理变化,TTC染色法测定大鼠脑组织梗死体积比的变化。结果:1.Zea-Longa评分结果:正常组、假手术组大鼠得0分,缺血再灌注6 h、24 h、72 h、1 w、2 w组得分各不相同,提示有神经功能受损,模型组与正常组相比,差异均具有统计学意义(P0.05)。2.Western blot结果:CDC42在各组大鼠的缺血侧脑组织中都有表达,正常组与假手术组中,CDC42有基础水平表达,且差异不具统计学意义,在再灌注6h、24h组中,CDC42显著减少,与正常组比较,差异具有统计学意义(P0.05);CDC42的表达随着再灌注时间的增加,其下降趋势减缓,至72h及1w时,CDC42表达已接近正常水平,与正常组相比较,差异不具统计学意义,2w时,CDC42表达再次下降,与正常组对比,其差异具有统计学意义(P0.05)。3.HE染色结果:正常组脑组织细胞排列整齐、结构完整清晰。1w组缺血侧脑组织细胞形态及排列不规则,核固缩,且结构紊乱。4.免疫组织化学染色结果:CDC42在大鼠海马DG区细胞的胞浆区有表达。5.ML141干预后Zea-Longa评分结果:ML141组的Zea-Longa得分较1 w组低,差异具有统计学意义(P0.05)。DMSO组得分与1 w组得分之间差异不具统计学意义。6.ML141干预后TTC染色结果:正常组脑组织无梗死灶,缺血再灌注1w组、ML141组及DMSO组均有大小不同的梗死灶,予ML141干预后,大鼠脑梗死体积比显著缩小,与1w组对比,差异具有统计学意义(P0.05),DMSO组与1w组的差异不具统计学意义。7.ML141干预后Western blot结果:ML141组CDC42表达减少,其差异与正常组、1w组相比均具具有统计学意义(P0.05)。DMSO组CDC42的表达与1w组相比差异不具统计学意义。结论:CDC42在大鼠脑缺血再灌注后缺血侧脑组织中的表达呈动态变化,用CDC42特异性抑制剂ML141干预后,大鼠的神经功能缺损程度及脑梗死体积比均有所下降,提示CDC42可能参与了大鼠脑缺血再灌注损伤。
【图文】：

正中靠下纵向切开皮肤约 1.5cm，钝内动脉，结扎颈总、颈外动脉（如图栓：结扎颈总动脉（远离颈总动脉分），用动脉夹夹闭颈内动脉，在颈总动，往颈内动脉方向缓慢插入消毒好的达大脑前动脉的起始部（插入长度约 时间，，再次消毒，切口处逐层缝合。缓慢拔出 MCAO 线栓。0mm 为假手术组，其余处理同上。整、保温饲养。

Zea-Longa 评分法评价大鼠神经功能缺损情况。结果示正 分，提示无神经功能受损，其余组得分各不相同，提示均各组分数（如表 1），发现各 MCAO 实验组的 Zea-Long如图 2）。表 1 各组大鼠 Zea- Longa 评分结果，M (P25, P75)ab. 1 The Zea- Longa Score of rats in different groups, M (P25, Pn Zea-Longa Score（score） Z 值/ 12 0.0(0.0, 0.0)ion 5 0.0(0.0, 0.0) 0.000 2.09552.0(1.5, 3.0) -3.93153.0(2.0, 3.0) -3.94252.0(2.0, 2.5) -3.961123.0(2.0, 3.0) -4.51752.0(2.0. 3.0,) -3.942pare the differences between each group and the normal group. b comeen multiple groups within the MACO groups.
【学位授予单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R743.3

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本文编号：2688024