RNA结合蛋白UNR促进人神经胶质瘤细胞的迁移并调控RPL9的表达

发布时间：2020-06-02 10:44

【摘要】：RNA结合蛋白种类较多,其可以结合单链或者双链RNA,在众多的细胞生物学进程中扮演重要角色,特别在转录后水平对基因表达有很重要的调控作用。它几近完全地参与了 RNA的代谢过程:经由构成核糖核蛋白复合物,它可以调控RNA的成熟,剪接,运输,多聚腺苷酸化,mRNA(message RNA)的稳定性,mRNA的翻译等等。目前有报道指出,当一些RNA结合蛋白表达异常或者发生突变,其可能参与一些恶性肿瘤的发生发展。UNR(Upstream-ofN-Ras),在哺乳动物中也被称作是 CSDE1(Cold Shock Domain containing E1)是一种具有五个保守冷休克结构域的RNA结合蛋白,其主要参与调控细胞生理进程中mRNA的稳定性,mRNA的翻译等过程。然而最近一些报道指出,UNR在人黑色素瘤中具有较高的蛋白表达水平并促进黑色素瘤的侵袭和转移;其较高的表达水平可以作为胰腺导管腺癌预后理想的分子标志物。但是,UNR是否在人神经胶质瘤中具有功能还是未知的。在我们的研究结果中,发现UNR在神经胶质瘤细胞和病人组织样本中呈较高的表达水平。并且,敲低UNR可以明显的抑制肿瘤细胞的迁移能力但不影响其细胞增殖。通过分析已公开的UNR在人黑色素瘤中的iCLIP-seq,RNA测序和核糖体印记测序这一系列测序数据,我们在神经胶质瘤细胞中通过RNA免疫沉淀和生物素标记的RNA pull down实验验证了 UNR可以结合PTEN和核糖体蛋白RPL9mRNA的3'UTR。同时,我们发现敲低UNR可以抑制RPL9的表达。RPL9在人神经胶质瘤中高表达,利用siRNA敲低RPL9,肿瘤迁移侵袭有关的标志物Vimentin的表达有明显的下调。这提示RPL9可能通过一定的机制参与调控了胶质瘤细胞的侵袭迁移。本研究首次在胶质瘤细胞中揭示了 RNA结合蛋白UNR的功能,并且发现了它可以调控核糖体蛋白RPL9的表达。这为我们更进一步研究胶质瘤的发展提供了新思路。
【图文】：

转录本,号外,异构体

是这在＿＋／－杂合小鼠的表型上并没有所表现［６］。另一方面，ｉＶ－ｒｍ基因的表逡逑达变化对ＷＶｉ？基因的表达也没有影响［７］。现代生物测序技术发现，ｔ／Ｍ？具有六逡逑个转录本，它们在２号，，３号和６号外显子上有所不同，如图２所示。之前的一逡逑项研究发现，缺少６号外显子的２号转录本与１号转录本相比在除了大脑以外的逡逑一些实验所用组织中均具有较高的表达水平［８］。除此之外，ＵＮＲ的２号蛋白异逡逑构体，其对应的转录本缺少６号外显子而使得蛋白异构体缺少３１个氨基酸［９］。逡逑该异构体与１号异构体相比，在发挥刺激人类鼻病毒（ＨＲＶ－２）邋ＩＲＥＳ处的翻译逡逑起始过程中具有更高的生物学活性［１（）］。逡逑Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ邋ｖａｒｉａｎｔ逦Ｅｘｏｎ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ逡逑４逦１邋１邋｜逦２逦１邋３邋１邋４邋１邋５邋１邋６邋１邋７邋１逦８－２１逦｜邋４３３０邋ｎｔ逡逑３逦１邋１邋｜逦２逦１邋３邋１邋４邋［邋Ｓ邋１邋７邋｜逦８－２１逦｜邋４２３７邋ｎｔ逡逑１逦１邋１邋ｊ邋２邋Ｉ邋４邋１邋５邋Ｉ邋６邋１邋７邋１逦８－２１逦丨邋４１８３邋ｍ逡逑２逦１逦１邋｜逦２逦１邋４邋１邋５邋｜邋７邋１逦８－２１逦＼邋４０９０邋ｎｔ逡逑５邋｜邋１邋ｊ邋４邋１邋５邋１邋６邋１邋７邋１逦８－２１逦￣｜邋３７９６邋ｎｔ逡逑６逦１逦１邋１邋４邋１邋５邋１邋７邋１逦８－２１逦１邋３７０３邋ｎｔ逡逑图２邋ＭＶｉ？各转录本的情况逡逑２．邋ＵＮＲ的生物学功能逡逑ＵＮＲ在基因表达调控中兼备着多种功能

模式图,模式图,测序,原始内胚层

蛋白（ＳＸＬ）邋—起，要抑制剂量补偿复合物中ｍｓｌ－２的翻译，它们通过结合在逡逑ｍｓｌ－２的３’ＵＴＲ来抑制其翻译，进而来抑制雌性生物中Ｘ染色体的剂量补偿［１５，１６］，逡逑如图３所示。逡逑３＇邋ＵＴＲ逡逑＂Ｐ，０逡逑４３Ｓ逦１逦ｅｌＦ４Ｇ邋｜逡逑５．ＵＴＲ逡逑图３邋ＵＮＲ作用于ｍｓｌ－２邋ｍＲＮＡ的３’ＵＴＲ模式图逡逑除此之外，在近期的一项研宄中，通过利用ＵＮＲ在人黑色素瘤中的ｉＣＬＩＰ－ｓｅｑ，逡逑ＲＮＡ测序和核糖体印迹测序这一系列测序数据的生物信息学分析，发现ＵＮＲ逡逑可能在翻译的延伸或者终止中发挥着重要作用［１７］。总而言之，ＵＮＲ作为一个逡逑ｍＲＮＡ调节因子，其发挥什么样的功能取决于其靶向结合哪种ｍＲＮＡ和细胞的逡逑类型。逡逑ＵＮＲ也介入一些正常的生理过程中。近年来一些报道指出，ＵＮＲ参与神经元逡逑的迁移，敲低ＵＮＲ会阻滞小脑前神经元朝目标区域的迁移ＵＮＲ参与维持人逡逑类胚胎千细胞处于未分化的状态［１９］；邋ＵＮＲ还阻滞小鼠胚胎干细胞向原始内胚层逡逑的分化［２（）］。逡逑３．ＵＮＲ与疾病逡逑ＵＮＲ与某些疾病的发生发展也有密切关系
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R739.4

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