L-苏糖酸镁对MPTP小鼠保护作用的研究

发布时间：2020-06-13 04:50

【摘要】：目的:国内外研究表明镁缺乏与帕金森病的发生发展密切相关,我们的前期研究证明了L-苏糖酸镁(Magnesium-L-threonate,Mg T)可以改善帕金森病1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)小鼠模型行为学障碍,并减少多巴胺神经元进行性缺失,但是L-苏糖酸镁对MPTP小鼠的保护机制尚不明确。已知在MPTP毒性损伤机制中,炎症和氧化应激在多巴胺神经元损伤过程中发挥重要作用,因此,本研究主要探讨口服Mg T后,MPTP小鼠黑质小胶质细胞活化和i NOS的变化。方法:本实验使用C57BL/6J小鼠(雄性,18-22g),称重后随机分为3组:正常对照组,MPTP模型组(腹注,连续7天,日一次,30mg/kg)和L-苏糖酸镁治疗组(口服Mg T+腹注MPTP,Mg T 1.2m M)。分别于腹腔注射MPTP后第1天及第7天,对小鼠进行处死取脑,评价Mg T对MPTP小鼠模型的神经保护机制,主要通过三个方面进行评价:1、多巴胺神经元的形态与数目改变:通过Kluver Barrer法和酪氨酸羟化酶(Tyrosine Hydroxylase,TH)免疫染色法观察Mg T对MPTP小鼠黑质多巴胺神经元的形态和数目的影响;2、通过离子钙接头蛋白(Ionized calciumbingding adaptor molecule-1,Iba-1)免疫组织化学染色探讨Mg T对小胶质细胞活化的影响;3、通过诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)免疫组织化学染色,评价Mg T对MPTP小鼠黑质致密部i NOS表达的影响。结果:1、Kluver Barrer染色观察发现,对照组细胞核大深染,卵圆形,位于胞体中央,核仁明显,胞体呈梭形或三角形;与对照组相比,模型组黑质神经细胞胞核染色变浅,胞体萎缩,胞浆减少;与模型组相比,Mg T治疗组神经细胞数目增加,核染色较深,胞体体积增大。TH免疫组化染色提示与对照组(66±11)相比,MPTP模型组小鼠黑质致密部TH阳性神经元数目(27.3±8)明显减少,Mg T治疗组TH阳性神经元数目(54.7±4.6)与MPTP模型组相比,神经元数目显著增加(P0.05)。2、小胶质细胞标记物Iba-1阳性细胞的活化:与对照组(0.0±0.0)相比,MPTP模型组小鼠黑质活化的Iba-1免疫阳性细胞数量(14.7±3.3)明显增加(P0.05),细胞体积增大,突起增粗;Mg T治疗组小鼠黑质区域的活化Iba-1阳性细胞数目(6.6±4.8)与MPTP组相比减少55.1%,P0.05。3、Mg T对i NOS蛋白表达影响的评价:与对照组相比,MPTP模型组小鼠黑质致密部区i NOS阳性细胞数(17.3±5.1)明显升高,P0.01;与MPTP模型组比较,Mg T治疗组小鼠黑质区i NOS阳性细胞(9.3±1.5)减少46.2%(P0.01)。结论:1、口服L-苏糖酸镁可以改善MPTP毒性引起的多巴胺神经元的形态改变及数目减少。2、L-苏糖酸镁可以降低MPTP引起的小鼠黑质小胶质细胞的活化和i NOS蛋白的表达,提示L-苏糖酸镁可能是通过抑制胶质细胞活化引起的炎症反应和减少氧化应激,对MPTP小鼠的多巴胺神经元缺失产生保护作用。
【图文】：

模式图,模式图,黑质,冠状

- 24 -图1 小鼠脑底观模式图Figure1 The schematic view of a mouse’s brain tissue图2 黑质断面模式图（冠状断Bregma - 3.08mm 至- 3.52mm）Figure2 The schematic view of substantia nigra（coronal section bregma -3.08mm to -3.52mm）

模式图,黑质,冠状,模式图

图1 小鼠脑底观模式图Figure1 The schematic view of a mouse’s brain tissue图2 黑质断面模式图（冠状断Bregma - 3.08mm 至- 3.52mm）Figure2 The schematic view of substantia nigra（coronal section bregma -3.08mm to -3.52mm）
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R742.5

【参考文献】