脑缺血再灌注损伤与自噬相关蛋白Beclin-1和Cathepsin B表达关系的研究

发布时间：2020-07-01 02:01

【摘要】：目的:脑梗死是神经学科最常见的疾病,尽早恢复缺血区域血流可以减轻缺血性损伤。但血运障碍的区域血液灌注恢复后,神经元进一步坏死,超过原有缺血引起的功能障碍,称作缺血再灌注损伤,或可导致预后不良。如何避免缺血再灌注损伤,进一步改善急性脑梗死患者的预后,有较大的研究价值。既往研究多采用预处理模型研究缺血再灌注损伤,在临床中是无法预测缺血性卒中发病时间的。本实验拟采用线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注大鼠模型,并在缺血同时使用雷帕霉素进一步激活自噬,观察不同处理组神经功能缺损、自噬相关蛋白Beclin-1、Cathepsin B表达的差异,探讨自噬对缺血再灌注损伤的作用。方法:将45只Wistar大鼠使用随机数法分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、雷帕霉素处理组(RAPA组),每组15只。I/R组使用线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,RAPA组在此基础上于缺血同时腹腔注射雷帕霉素。I/R组及RAPA组脑缺血2 h后再灌注,24 h后使用longa等的神经功能标准进行神经功能缺损评分,缺血侧脑组织HE染色后在400倍光镜下观察细胞病理学改变,Western Blot法测缺血侧脑灰质自噬相关蛋白Beclin-1与Cathepsin B的表达。结果:Sham组未见神经功能缺损症状,I/R组、RAPA组均出现不同程度神经功能缺损,I/R组神经功能缺损程度最重,RAPA组次之,结果有显著统计学差异。较Sham组,I/R组、RAPA组大鼠缺血侧脑组织中Beclin-1、Cathepsin B表达增强,RAPA组较I/R组表达增强更明显。Sham组神经细胞形态完整,细胞膜存在,细胞核居中,核周见尼氏小体。I/R组神经细胞排列不规则,数量减少,大量神经细胞胞质深染,核固缩、部分溶解,胞质内尼氏小体消失。RAPA组神经细胞也可见排列不规则,数量处于Sham组与I/R组之间,部分神经细胞核固缩、核溶解。结论:1)I/R可造成相应区域脑组织损伤,自噬水平提高;2)大鼠脑缺血时使用雷帕霉素激活自噬,通过上调Beclin-1和Cathepsin B的表达,可减轻神经功能缺损与脑细胞损伤;综上所述,缺血时激活自噬对缺血再灌注大鼠具有明显的神经保护作用。
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R743.3
【图文】：

1 各组大鼠神经功能缺损评分的比较gure 1 comparison of neurological impairment scores in rats in each group Sham 组比较，*P＜0.01；与 I/R 比较，#P＜0.01.2 Western Blot 法测自噬相关蛋白的表达较 Sham 组，I/R 组、RAPA 组大鼠缺血侧脑组织中 Beclin- 表达增强，RAPA 组较 I/R 组表达增强更明显。见图 2、3、4 2 Western blot 法测大鼠脑组织 Beclin-1 的表达gure 2 Beclin-1 expression in brain tissue of rats measured by Western blot methodSham 组；B I/R 组；C RAPA 组

图 1 各组大鼠神经功能缺损评分的比较Figure 1 comparison of neurological impairment scores in rats in ea与 Sham 组比较，*P＜0.01；与 I/R 比较，#P＜0.012.2 Western Blot 法测自噬相关蛋白的表达较 Sham 组，I/R 组、RAPA 组大鼠缺血侧脑组B 表达增强，RAPA 组较 I/R 组表达增强更明显

【参考文献】

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1 李春明;舒适;钱小路;尤艳利;宋慧敏;周爽;;自噬与脑缺血-再灌注损伤的研究进展[J];中国脑血管病杂志;2015年06期

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本文编号：2736137