髓系细胞触发受体-1在实验性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的表达研究

发布时间：2020-07-27 19:22

【摘要】：目的:蛛网膜下腔出血(SAH)是严重的脑血管疾病之一,具有高死亡率及致残率,近年来认为早期脑损伤(EBI)是导致SAH患者预后不佳的主要原因,在EBI中炎症反应起关键的作用。而髓系细胞触发受体-1(TREM-1)被认为是炎症发生和放大的关键介质,可能参与EBI过程中的炎症反应,之前研究初步发现在SAH患者的脑脊液(CFS)中可溶性TREM-1(sTREM-1)浓度增加,但是TREM-1表达规律尚不清楚,因此,本研究将进一步检测在实验性SAH后EBI中TREM-1的表达,观察TREM-1在SAH后EBI时间窗内不同时相大鼠脑组织中的表达及研究TREM-1与炎症因子和神经功能学评分的相关性,探索TREM-1在EBI形成过程中的作用,为防治EBI提供新靶点。方法:采用颈内血管穿刺法制备SAH模型,所有模型术后均评估出血严重程度及神经功能学评分。首先将12只大鼠随机分成假手术组及SAH组,造模后24h用免疫组织化学方法测定脑组织中TREM-1的表达。后将48只大鼠随机分成假手术组及6h,12h,24h,48h和72h 5个不同时相组,造模后分别取脑脊液备用及脑组织通过蛋白质印迹进一步分析TREM-1水平动态变化。然后在TREM-1表达水平峰值的时间点,通过酶联免疫吸附试验法测定该时间点大鼠CSF中TNF-α和IL-1β水平,最后分析TREM-1表达与TNF-α和IL-1β水平及神经功能学评分之间的相关性。结果:1.采用免疫组织化学法分析显示在大鼠SAH后24h时TREM-1阳性细胞数与假手术组比较表达明显增加(2.67±0.82 vs 0.83±0.41),具有统计学意义(P0.05)。2.采用蛋白印迹法分析结果显示在大鼠SAH后EBI时间窗内5个不同时相TREM-1的表达水平存在动态变化,在SAH后6h开始增加并且在48h达到峰值,但在12h至72h之间TREM-1蛋白表达显着高于假手术组,具有统计学意义(P0.05)。3.相关性分析显示TREM-1的产生与TNF-α(r=0.726,P=0.0410.05)和IL-1β(r=0.711,P=0.0480.05)表达呈正相关,与神经功能学评分呈负相关(r=-0.743,P=0.0350.05)。结论:在实验性SAH后EBI脑组织中TREM-1表达呈动态变化,且于48小时达高峰,与炎症严重性和神经功能学评分相关,表明TREM-1可能与SAH后EBI炎症级联反应有关。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R743.35
【图文】：

大鼠,脑组织,覆盖区,网状

鼠死亡率在 TREM-1 的免疫组织分析研究中共用 14 只大鼠，假手术组无大AH 组中 8 只大鼠中有 2 只在处死前死亡（25.0％）。在 TREM-1 的蛋白印迹的动态表达中，共用 64 只大鼠，假手术组，而 SAH 组中 56 只大鼠中有 16 只在处死之前死亡（28.5％），不数如下：在 SAH 后 6h 时 12 只大鼠中 4 只在处死前死亡（33.3％）时使用 11 只大鼠，其中有 3 只在处死前死亡（27.3％），同样在 SA只大鼠中有 3 只死亡（27.3％），SAH 后 48h 时 12 只大鼠中有 4 只死亡时 10 只大鼠中有 2 只死亡（20％）。术后 5 个时相死亡率之间比（P = 0.969 > 0.05，χ2= 0.828）。

神经功能,免疫组织化学法,颞叶,统计学意义

图 2 SAH 后不同时间点出血严重程度评分及神经功能学评分2.3 TREM-1 表达采用免疫组织化学法分析 TREM-1 的表达，选取在 SAH 后 24 小时时大鼠右侧基底颞叶中进行研究，结果显示在 SAH 后 24h 时 TREM-1 阳性细胞数与假手术组比较表达明显增加（2.67±0.82 vs 0.83±0.41），且具有统计学意义（P<0.05，如图 3）。

蛋白印迹法,硕士学位论文,颞叶,统计学意义

山西医科大学硕士学位论文图 3 SAH 后 24 小时采用免疫组织化学分析 TREM-1 表达采用蛋白印迹法分析 TREM-1 的表达，选取在 SAH 建模后的 5 个不同时相鼠右侧基底颞叶进行研究，结果显示在 SAH 的 5 个不同时相 TREM-1 的表达水存在动态变化，具体为在 SAH 后 6h 开始增加并且在 48h 达到峰值（如图 4），在12h至72h之间TREM-1蛋白表达显着高于假手术组，且具有统计学意义(* P<0** P<0.01)。

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