ERK5在大鼠脑梗死和脑出血转化中的激活表达情况

发布时间：2020-09-25 08:32

　　 研究目的:脑梗死是一个常见的神经系统疾病,目前对于该病的治疗,临床常用的方法有溶栓、抗凝和抗血小板等内科治疗。而溶栓治疗会引发脑梗死后出血性转化(Hemorrhagic transformation,HT)。ERK5途径被认为丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路重要组成部分,可以在哺乳动物的多种组织中普遍表达,而ERK5可能与炎症和许多疾病的发生、发展有着密切的联系。本研究通过构建大鼠持续性脑缺血及出血性转化模型,观察大鼠脑组织ERK5在脑出血转化过程中的激活表达情况,探讨ERK5在脑出血转化过程可能发挥的作用及其临床指导意义。研究方法:健康成栓线继续栓塞24h。假手术组与出血性转化组相同,但栓线插入2cm左右后随即拔出,不造成大脑中动年雄性Sprague-Dawley大鼠180只(体质量250-300g)随机分为假手术(Sham)组,持续性缺血(Ischemia)组和脑出血性转化(HT)组,每个组随机分为4h,8h,16h,24h四个不同时间点。采用Z-Longa线栓法及谢惠芳等的改良方法制作大鼠右侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral occlusion,MCAO)模型,出血性转化组分别在大脑中动脉栓塞4h,8h,16h,24h后拔出栓线,再灌注24h。持续性缺血组在4h,8h,16h,24h后不拔出脉的栓塞。采用Berderson评分法在大鼠术后2h进行评分。利用TTC染色法进行染色,观察大鼠脑组织梗死及出血情况。采用western blotting检测ERK5的蛋白激活表达水平,采用real-time PCR检测mRNA的表达。结果:1.神经功能评分:假手术组大鼠均未见明显神经功能损害,持续性缺血组和出血性转化组都有不同水平的神经功能缺失。2.TTC染色:假手术组未显示梗死及出血区,持续性缺血组各亚组脑组织呈现白色梗死区,但是未见明显出血点或红色血肿,而在脑出血转化组8h时即可在白色梗死区发现不同程度的血肿形成,且16h和24h亚组的血肿发生率较高。3.western blotting检测结果:与假手术组相比,脑出血性转化组和持续性缺血组各时间点p-ERK5的蛋白表达显著增高(P0.05)。与持续性缺血组各亚组相比,脑出血性转化组各亚组p-ERK5蛋白表达量也明显增高(P0.05)。脑出血转化组各亚组之间随时间的延长p-ERK5蛋白表达量逐渐升高,至16h时达到高峰,至24h时表达量仍维持在较高的水平(P0.05)。持续性缺血组各亚组之间随时间的延长p-ERK5蛋白表达量也稍有升高,但差异无统计学意义(P0.05)。各大组及各个亚组之间总ERK5蛋白表达量差异无统计学意义(P0.05)。4.real-time PCR结果显示,三个大组及各亚组之间ERK5 mRNA的表达量差异没有统计学意义(P0.05)。结论:大鼠脑缺血及脑出血转化可以诱导ERK5的激活,使ERK5参与脑缺血与出血转化过程并在此过程中发挥重要作用。
【学位单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R743.3
【部分图文】：

功能评分为 3 分的大鼠进行 TTC 染色观察后发现，在 8 小时亚组内即可在白色梗死区发现有不同程度的血肿及出血点形成，且 16h 和 24h 亚组的血肿发生率更高，所选的16只大鼠中有12只大鼠都可见到不同程度的血肿出现，发生率可达75%[图1]，结果说明该出血转化模型较为成功，出血率较高。

青岛大学硕士学位论文4]。假手术组四个亚组之间的 p-ERK5 蛋白表达量基本无显著差异（P>0.05) [图 4]。随后，我们检测了各组大鼠 ERK5 的蛋白表达的情况，在整个实验观察中发现，假手术组、持续性缺血组及出血性转化组之间和各个亚组之间的总 ERK5 蛋白表达量差异均无统计学意义（P>0.05)[图 3，图 5]。

图 3.各组大鼠在同一时间点 ERK5 蛋白表达量的比较Fig.3 Expression of ERK5in each group at the same time注：(A) Western blot analysis of ERK5 with β-actin as the reference. (B) Quantified protein levelof ERK5 at 4h, (C) Quantified protein level of ERK5 at 8h, (D) Quantified protein level of ERK5 at16h, (E) Quantified protein level of ERK5 at 24h. *P<0.05 vs sham group, #p<0.05 vs ischemia group.

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 周航;;急性期脑梗死溶栓后出血性转化的CT与MRI诊断价值分析[J];中外医疗;2015年34期

2 肖洁;李小刚;;局灶性脑梗死出血转化模型中基质金属蛋白酶9的表达[J];中国组织工程研究;2015年49期

3 霍晓婷;王雪杰;刘国萍;汪志云;倪红艳;张顺;朱文珍;尹建忠;;急性脑梗死SWI低信号与血脑屏障完整性对于出血性转化的早期判断[J];中风与神经疾病杂志;2014年11期

4 刘娜;徐树军;王淑荣;陈业鹏;周勇;冯艳春;;MMP-9、GFAP和FN浓度与脑梗死后出血转化的预测作用[J];中国现代医学杂志;2014年16期

5 李晓岚;;脑梗死后出血性转化的临床特征及危险因素分析[J];临床和实验医学杂志;2014年01期

6 杨继党;林清原;;静脉溶栓对合并脑微出血的急性脑梗死后出血性转化的影响[J];实用医学杂志;2013年11期

7 王世芳;肖卫民;吴志强;;急性脑梗死静脉溶栓后早期脑出血转化的相关因素分析[J];赣南医学院学报;2013年02期

8 孙yN菲;;出血性转化的临床进展[J];中国老年学杂志;2012年23期

9 丁红;王辉;吴岩峰;徐运;;大面积脑梗死后出血性转化的危险因素分析[J];中风与神经疾病杂志;2012年03期

10 陈建勇;王聪;王娟;曹礼荣;;MAPK信号通路研究进展[J];中国医药科学;2011年08期

相关硕士学位论文 前1条

1 谷宁;神经调节素对脑缺血再灌注损伤后ERK5信号通路的调节机制[D];青岛大学;2017年

本文编号：2826492