PPFIBP1在胶质母细胞瘤中的作用及其在肝脏组织中的表达

发布时间：2020-10-09 06:01

　　胶质母细胞瘤是恶性程度最高的脑部肿瘤并且预后较差,其疾病进展快速且易致死,患者的中位生存期都较短,一般仅为12个月。目前胶质母细胞瘤的标准治疗方法是在安全可行的范围内进行手术切除然后辅以药物和放射性治疗。但是患者的术后复发概率较高并且复发时间较短(通常在8个月之内)。恶性胶质瘤侵袭能力的强弱是肿瘤原位复发以及远端转移的重要因素,肿瘤转移是癌症患者中最常见的死亡原因。此外,由于肝癌在我国的癌症致死率排名中一直位列前五,对我国人民的生命和健康造成严重威胁,所以除了对于胶质母细胞瘤的研究外,还进一步研究了PPFIBP1蛋白在肝癌、肝硬化、肝炎以及正常肝组织中的表达,以此来探索PPFIBP1蛋白与肝癌的形成过程之间是否存在某种联系。PPFIBP1已经被证实是一种与癌症相关的基因,由PPFIBP1编码的liprin-β1蛋白属于白细胞共同抗原相关(LAR)跨膜酪氨酸磷酸酶相互作用蛋白家族,研究表明转移相关蛋白S100A4在体内能够与liprin-β1特异性相互作用,并且该蛋白已经被证实能够诱导原发性肿瘤的侵袭性并促进肿瘤转移。但是目前并没有PPFIBP1基因在胶质母细胞瘤或肝癌患者中的研究。我们通过划痕实验以及transwell侵袭实验来研究PPFIBP1基因表达的改变对胶质母细胞瘤迁移或侵袭的影响。结果发现在PPFIBP1基因过表达的胶质母细胞瘤细胞中迁移和侵袭的速率要远高于对照组,而在PPFIBP1基因进行敲降后其结果正好相反。通过免疫组化对肝脏组织芯片进行染色后我们发现在原发性肝细胞癌(HCC)中的PPFIBP1基因的表达显著高于具有肝炎或肝硬化迹象的非肿瘤肝组织。表明PPFIBP1基因可能参与肝细胞癌的恶性转化和发展。以上研究结果表明PPFIBP1基因的可以作为人脑胶质母细胞瘤以及肝细胞癌的新型生物标志物和治疗靶标。
【学位单位】：长春理工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R739.4
【部分图文】：

示意图,基本原理,示意图,微孔膜

图 2.1 Transwell 基本原理示意图实验原理如图 2.1 所示：Transwell 小室的结构如上图所示，上室的底部是膜，组成成分是聚碳酸酯，膜的直径为 6.5mm，膜上有许多直径仅为 8μm 将 Matrigel 按照一定的比例稀释后加入上室后，可以在微孔膜上形成一层模基质的屏障。当肿瘤细胞用不含血清的培养基重悬并加入到 transwell insert，下室中加入含有血清或其他特定的趋化因子培养基后，肿瘤细胞会从上室化因子的下室进行转移。由于两室之间的微孔膜上已经预先铺上了一层基质细胞外基质，因此细胞要想从上室移动到下室必须要先将基质胶进行消化降同的细胞数目以及培养条件下培养相同时间后，可以通过观察微孔膜上的侵数目来比较不同处理后的肿瘤细胞之间的侵袭能力是否存在差异。）根据实验的用量从-20℃冰箱中取几支事先分装好的 Matrigel 胶放在 4℃冰化，实验用到的无血清培养基、枪头和 Transwellinsert 要提前放在 4℃冰箱。）从 4℃冰箱将 Matrigel 胶取出后迅速放到冰上，防止 Matrigel 胶凝固。然后冷好的枪头和培养基将 Matrigel 胶稀释到合适的浓度并混匀（在本实验中

过表达,细胞,对照组

图 3.2 过表达细胞与对照组细胞中 PPFIBP1 基因的表达水平a)U251 细胞 b)U87 细胞 3.3 所示：荧光定量 PCR 实验数据显示，在 U251 和 U87 敲降 PP中，其 mRNA 的表达量明显要低于对照组细胞（P<0.001）。图 3.3 敲降细胞与对照组细胞中 PPFIBP1 基因的表达水平a) b)a)b)

细胞,对照组,过表达

BP1 基因的细胞中，其 mRNA 的表达量明显要高于对照组细胞（P<0.0图 3.2 过表达细胞与对照组细胞中 PPFIBP1 基因的表达水平a)U251 细胞 b)U87 细胞 3.3 所示：荧光定量 PCR 实验数据显示，在 U251 和 U87 敲降 PPFIB中，其 mRNA 的表达量明显要低于对照组细胞（P<0.001）。a) b)

【参考文献】