慢性酒精摄入通过NO信号通路影响小鼠的运动协调功能

发布时间：2020-10-22 04:45

　　 [目的]本研究主要通过行为学测试和药理学手段.观察慢性酒精摄入对小鼠运动协调能力的影响,探索慢性酒精摄入对小鼠运动协调功能的影响机制。[方法]本研究选取6-8周ICR雄性小鼠50只,将小鼠分为5组,即对照组、酒精低剂量组、酒精高剂量组、酒精高剂量+L-NNA组和酒精高剂量+AM251组(每组10只)。对照组腹腔注射9g/kg生理盐水,低剂量组注射0.8g/kg酒精,高剂量组注射1.6g/kg酒精,每组注射周期为28天。注射结束后第1天、1周、2周和3周分别使用行走障碍分析仪及转棒仪进行运动协调功能检测实验。酒精高剂量+L-NNA组和酒精高剂量+AM251组分别注射一氧化氮氧合酶抑制剂(L-NNA;1mg/kg)和大麻素受体1(CB1)受体抑制剂(AM251;10mg/kg)后,分别观察药物注射后慢性酒精摄入小鼠运动行为的影响。数据经整理后,采用SPSS17.0分析软件进行数据统计学分析,各组均数的比较采用单因素方差分析和t检验,P0.05认为有统计学差异。[结果](1)慢性酒精摄入组小鼠的步态错误次数和错步持续时间均比对照组小鼠显著增加,差异均有统计学意义(P0.05)。而高剂量组小鼠的步态错误次数和错步持续时间较低剂量组显著增加,差异亦有统计学意义(P0.05),提示酒精摄入对运动协调的损伤作用具有剂量依存性。(2)与对照组相比,摄入酒精组小鼠在转棒上的持续时间明显缩短,对转棒仪的转速要求明显减小,均有统计学意义(P0.05)。(3)腹腔注射NO合成酶抑制剂(L-NNA)改善酒精摄入对运动协调的损伤作用,表现为步态错误次数和错步持续时间显著降低,且在转棒上持续时间及转速显著增加,差异均有统计学意义(P0.05)。(4)腹腔注射CB1受体抑制剂(AM251)后,酒精摄入小鼠步态错误次数、时间,以及转棒上持续时间和转速没有显著变化,与给药前相比均无统计学差异(P0.05)。(5)酒精摄入对小鼠运动协调功能的损害作用,在停止酒精摄入后逐渐减轻,3周后可完全消退,恢复到酒精摄入前水平。[结论](1)慢性酒精摄入对小鼠运动协调功能有显著的损伤作用,该损伤作用是通过NO信号通路来实现的,但与脑内CB1受体的活化无关。(2)慢性酒精摄入对小鼠运动行为的损伤作用是可逆的,停止酒精摄入3周后消退,恢复到酒精摄入前水平。
【学位单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R741
【部分图文】：

经过２８天的酒精摄入，我们利用行走障碍分析仪观察了酒精对行走??运动的影响。长期酒精摄入后，可剂量依存地增加四肢行走的错误率。??典型例子如图１Ａ和１Ｂ所示，１例酒精高剂量组小鼠四肢在１次测试中??一共出现３次错误，错步共持续４８ｍｓ，分别出现在第１３和３８传感棒上。??酒精低剂量（〇．８ｇ／ｋｇ）组小鼠四肢（图１Ｃ）和前肢（图１Ｅ）行走错误??次数显著高于对照组（尸＜０．０５），而高剂量（１．６ｇ／ｋｇ）组小鼠四肢（图??１Ｃ）和前肢（图１Ｅ）行走错误次数显著高于低剂量组（ＰＣ０．０５）。??Ａ?Ｂ??２?■＊］?？５０＇??ｇ?３－?ｆ４０＇??Ｉ?２－?？?Ｉ３０－?＊??１?１－?．?｜２０＇?？??｜???Ｉ１０＇?？??０?１０?２０?３０?４０?５０?６０?７０?８０?０?１０?２０?３０?４０?５０?６０?７０?８０??广＾?Ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｓｅｎｓｏｒｓ?（Ｎ）?Ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｓｅｎｓｏｒｓ?（Ｎ）??Ｃ?勹?＾?１２０－??＼?Ｖ?％?＼?Ｖ?＼??Ｅ?＇?、＼?Ｆ?，?、?％?＼??：３－?＊?Ｓ９Ｄ－?＊??Ｉ，?ｍ?｛－?ｍ??＼?＼?Ｖ?＼?＼?＼??＼?＼?〇ｚ?＼?＼??图１．慢性酒精摄入对行走运动协调的影响。（Ａ）?１例高剂量组小鼠在１次测试??中的四肢行走错误次数；（Ｂ）?１例高剂量组小鼠在１次测试中的四肢行走错步持??续时间；（Ｃ）不同剂量酒精摄入对四肢行走错误次数的影响；（Ｄ）不同剂量酒??精摄入对四肢行走错步持续时间的影响；（

长期酒精摄入后，可剂量依存地缩短小鼠在加速转棒上的持续时间，同??样，掉落时的转速也剂量依存地减慢。低剂量组小鼠在加速转棒上的持??续时间（图２Ａ）显著短于对照组（Ｐ＜０．０５），而高剂量组小鼠在加速??转棒上的持续时间（图２Ａ）短于低剂量组（Ｐ＜０．０５）。低剂量组小鼠??掉落时的转速（图２Ｂ）显著慢于对照组（户＜０．０５），而高剂量组小鼠??掉落时的转速（图２Ｂ）慢于低剂量组（Ｐ＜０．０５）。??Ａ?１２０－，?８??９０－?１５－?１??ｌ６〇－?ｒｈｕｌ?＊?＝ｉ〇－?ｕＭ??ｆｉｌ?Ｍｍ?＊ｉｌ?Ｍｂ??％％?＼?＼?＼?＼?＼??？％?％?。，?＼?＼??图２．慢性酒精摄入对平衡调节的影响。（Ａ）不同剂量酒精摄入对小鼠在转棒仪??上的持续时间的影响；（Ｂ）酒精摄入对小鼠从转棒仪上掉落时转速的影响；＊户??＜０．０５与对照组相比；＃?Ｐ＜０＿０５与低剂量组比较。??３．３?ＮＯ合成酶抑制剂对酒精摄入引起的行走运动损伤的影??响??在高剂量酒精摄入结束后的第１天小鼠腹腔注射ＮＯ合成酶抑制剂??（Ｌ－ＮＮＡ），然后利用行走障碍分析仪观察了?ＮＯ合成酶抑制剂对慢性??酒精摄入引起的行走运动损伤的影响。给高剂量组小鼠腹腔注射ＮＯ合??成酶抑制剂后发现，能减少高剂量组小鼠四肢行走的错误率。典型例子??如图３Ａ和３Ｂ所示，１例酒精摄入高剂量＋Ｌ－ＮＮＡ组小鼠四肢在１次测??试中一共出现１次错误，错步共持续１６ｍｓ，出现在第２７个传感棒上。??７??

?结果??酒精摄入高剂量＋Ｌ－ＮＮＡ组小鼠四肢（图３Ｃ）行走错误次数显著低于高??剂量组（尸＜０．０５），酒精摄入高剂量＋Ｌ－ＮＮＡ组小鼠四肢（图３Ｄ）错??步持续时间显著短于高剂量组（Ｐ＜Ｔ０．０５）。??Ａ?Ｂ??—４－｜?一?５０－｜??Ｚ．?Ｗ??ａ＞?３－?５?４０－??〇?Ｏ??２－?Ｉ３０＇??２?〇?２０－??？?专?１０－?〇??Ｂ?？??名?〇￣＇；＿１．?〇?Ｇ—丨丨，丨…丨广丨＾＞＜＾如而丨丨丨“丨，丨丨画》？??０?１０?２０?３０?４０?５０?６０?７０?８０?０?１０?２０?３０?４０?５０?６０?７０?８０??Ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｓｅｎｓｏｒｓ?（Ｎ）?Ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｓｅｎｓｏｒｓ?（Ｎ）??Ｃ?”?＾?１２０－??？?３－?－９〇－?＿＿，??ｒ?■?＃?ｒ?＿??＼?＼?ｓ?＼?＼、??图３．?ＮＯ合成酶抑制剂对酒精摄入引起的行走运动损伤的影响。（Ａ）?１例酒精摄??入高剂量组＋Ｌ－ＮＮＡ组小鼠在１次测试中的四肢行走错误次数；（Ｂ）?１例酒精摄??入高剂量组＋Ｌ－ＮＮＡ组小鼠在１次测试中的四肢行走错步持续时间；（Ｃ）对照组、??酒精摄入高剂量组和酒精摄入高剂量组＋Ｌ－ＮＮＡ组的四肢行走错误次数；（Ｄ）??对照组、酒精摄入高剂量组和酒精摄入高剂量组＋Ｌ－ＮＮＡ组的四肢行走错步持续??时间。＃Ｐ＜０．０５与高剂量组比较。??３．４?ＮＯ合成酶抑制剂对酒精摄入引起的平衡调节损伤的影??响??在高剂量酒精摄入结束后的第１天小鼠腹腔注射ＮＯ合成酶抑制剂??（Ｌ－ＮＮＡ）
【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 吴永涛;刘宏亮;陈兴书;蔡其燕;姚忠祥;;大麻素受体在成年大鼠脑组织中的分布特点[J];中国康复医学杂志;2009年03期

本文编号：2851111