腺苷预处理星形胶质细胞氧糖剥夺复氧糖后CX3CL1、GLT-1表达的变化

发布时间：2020-11-01 11:46

　　 目的探讨在缺氧复氧情况下腺苷预处理诱导星形胶质细胞谷氨酸转运体蛋白(GLT-1)和趋化因子(CX3CL1)的表达变化。方法原代培养的大鼠星形胶质细胞分为正常组、模型组和腺苷预处理组。模型组:细胞接受5 h氧糖剥夺/复氧糖24 h处理;腺苷预处理组:细胞在氧糖剥夺前24 h加入100μmol/L腺苷后接受5 h氧糖剥夺/复氧糖24 h。在5 h氧糖剥夺/复氧糖24 h后观察各组的细胞形态、MTT法检测各组细胞活力,ELISA检测各组CX3CL1的相对表达情况,免疫荧光法及Western印迹法检测各组GLT-1的相对表达情况。结果①正常组、模型组和腺苷预处理组在氧糖剥夺5 h复氧糖24 h后细胞活力(OD值)分别是(0.763±0.065),(0.217±0.052)和(0.404±0.013),腺苷可以减少缺氧复氧引起的损伤(P0.05)。②与正常组相比,星形胶质细胞在缺氧复氧后,其释放的趋化因子CX3CL1明显升高(P0.05),GLT-1的表达明显降低(P0.05)。与模型组相比,腺苷预处理组可明显降低缺氧复氧组CX3CL1的释放(P0.05),以及增加缺氧复氧GLT-1的表达水平(P0.05)。结论腺苷预处理可使氧糖剥夺/复氧糖后CX3CL1的释放减少,GLT-1表达量升高,从而增强脑对缺血再灌注损伤的耐受。
【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 实验分组和OGD模型的建立[3]
    1.3 星形胶质细胞形态学观察
    1.4 细胞活性检测
    1.5 ELISA检测CX3CL1表达
    1.6 免疫荧光测GLT-1的表达[4]
    1.7 Western印迹测GLT-1表达量
    1.8 统计学方法
2 结果
    2.1 星形胶质细胞的原代培养及鉴定结果
    2.2 各组星形胶质细胞形态观察及活力检测结果
    2.3 MTT
    2.4糖氧剥夺复糖氧24 h后细胞培养液中CX3CL1浓度
    2.5 GLT-1免疫荧光结果
    2.6 Western印迹检测氧糖剥夺/复糖后GLT-1的表达
3讨论

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