难治性癫痫患儿血清中GADA及GM1-A的表达及意义

发布时间：2020-11-15 02:02

　　 目的研究儿童难治性癫痫(refractory epilepsy,RE)血清中谷氨酸脱羧酶抗体(glutamic acid decarboxylase antibody,GADA)及神经节苷脂抗体(antibodies to GM1 ganglioside,GM1-A)的表达及水平,分析儿童RE的免疫学发病机制与上述两种自身血清抗体的相关性,从而为临床诊断及治疗与免疫有关的RE提供新的思路及科学依据。方法本研究共分为两组,即难治性癫痫组(RE组)及药物可控性癫痫组(Controlled epilepsy group,CE组),每组45例。选取2015年11月至2016年11月唐山市妇幼保健院小儿神经内科的住院及门诊随访登记的癫痫患儿300例,根据纳入排除标准筛选出206例癫痫患儿,其中难治性癫痫患儿45例,药物可控性癫痫患儿161例。把45例难治性癫痫患儿作为病例组(RE组),随机选取45例药物可控性癫痫患儿作为对照组(CE组)进行研究分析。所有入组患儿的癫痫、癫痫综合征的定义标准及癫痫的发作分类标准均符合国际抗癫痫联盟(International League Against epilepsy,ILAE)指南制定的标准。同时根据小儿本身的年龄特点及我国制定的儿童RE的定义标准,入组患儿同时符合国内制定的儿童RE的定义标准。然后分别记录每一个入组患儿的性别、年龄、发病年龄、癫痫的临床发作类型、每月发作次数、实验室检查结果等。采集每个入组患儿的晨起空腹血,放入离心机离心血清,然后用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测RE组及CE组患儿的血清GADA和GM1-A的数值。采用SPSS17.0统计学软件对实验结果进行分析,对于计量资料以均数±标准差((?)±s)表示,两组间比较采用独立样本t检验;两组间率的比较采用c2检验;同时采用正态性检验各变量是否符合正态分布,对于计量资料不符合正态分布的采用非参数秩和检验;利用ROC(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析法判断血清GADA及GM1-A对儿童RE的诊断性能;绘制出ROC曲线并计算ROC曲线下面积。结果以α=0.05为检验水准。结果1 GADA及GM1-A在RE组及CE组均有表达,并且这两种抗体在RE组中的表达水平均显著高于CE组,差异具有统计学意义。2 GADA及GM1-A的表达水平与儿童难治性癫痫的发生具有相关性,当GADA的表达水平高于中位数浓度0.96mmol/L时,其发生难治性癫痫的危险性为16.188;当GM1-A的表达水平高于中位数浓度4.84ng/ml时,其发生难治性癫痫的危险性是5.451。3 GADA及GM1-A的ROC曲线下面积AUC(area under curve,AUC)分别为0.847、0.759,并且GADA的95%可信区间(CI)为0.767-0.928,GM1-A的95%可信区间(CI)为0.660-0.857,均大于0.5,表明两种抗体对儿童RE具有一定得诊断价值。4由ROC曲线分析出GADA及GM1-A最佳截点浓度值分别为0.96mmol/L、4.36ng/ml,也是两种抗体诊断RE的灵敏度和特异度同时达到最大时所对应的浓度值。进一步绘制出两种抗体联合的ROC曲线,得出的AUCROC为0.878,分别大于GADA及GM1-A的AUCROC,说明联合两种抗体对RE的诊断价值大于单独一种抗体。结论1儿童RE多伴有自身免疫功能紊乱,血清中可检测到与癫痫难以控制有关的GADA及GM1-A抗体。2 GADA及GM1-A与RE发生有关,当两种抗体的表达大于中位数浓度时,其发生RE的危险性增加。3联合检测GADA及GM1-A血清滴度水平对于诊断、治疗及预后判断儿童RE具有指导作用。
【学位单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R742.1
【部分图文】：

7°恒温箱温育 60min；复洗板 5 次，方法：取出温育后的酶标板，迅速甩去孔中液，然后在每孔中把洗涤液加满并静置 1min 后甩去，在吸水板 5 次后，加底物 A 和底物 B 各 50ul 于每孔中，锡纸避光箱孵育 15min；后分别于每孔中加入终止反应液 50ul，加完后在 15min 内仪并设置波长为 450nm 测定各个样品和标准品的 OD 值。计算方法测出的各个标准品浓度对应的 OD 值，在 EXCLE 工作表中标准品浓度，Y 轴上为标准品对应的 OD 值，首先绘制出标并得出曲线的回归方程式（见图 1、图 2），然后将各个样，计算出样品浓度，再乘以原来的稀释倍数，得出样品的实

测出的各个标准品浓度对应的 OD 值，在 EXCLE 工作表中标准品浓度，Y 轴上为标准品对应的 OD 值，首先绘制出标并得出曲线的回归方程式（见图 1、图 2），然后将各个样，计算出样品浓度，再乘以原来的稀释倍数，得出样品的实图 1 GADA 的标准品曲线图Fig.1 Standard curve of GADA

华北理工大学硕士学位论文具有统计学意义（P＜0.001），（见表 7、见图 3），说明 GADA 组患儿中均有表达，但在 RE 组中表达水平较 CE 组明显升高。表 7 GADA 在 RE 组和 CE 组的浓度比较（mmol/L）Table7 Comparison of the concentrations of the GADA in RE and CE groups百分位数最大值 最小值 Z 值 P25P50P751.01 2.20 3.24 11.61 0.01-5.311 0.29 0.58 0.88 3.5 0.01
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本文编号：2884206