存活蛋白对胶质瘤细胞替莫唑胺敏感性的影响
【部分图文】：
氧化物酶标记的山羊抗兔IgG(1:8000)，室温孵育1h；TBST漂洗，ECL曝光定影。用BandScan4.3软件对各条段灰度值进行测定分析。1.7统计学处理采用SPSS14.0软件行统计学分析。计量资料以x±s表示，组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验；计数资料以率表示，组间比较采用SNK-q检验。P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1不同转染方法对U87细胞中survivin表达水平的影响稳定转染干扰载体的U87/sursi细胞中survivin表达明显降低(P<0.01)，而稳定转染survivin的U87/sur细胞中survivin表达明显升高(P<0.01，图1)。图1各组细胞survivin表达水平(Westernblotting)Fig.1Expressionofsurvivinineachgroupofcells(Westernblotting)(1)P<0.01comparedwithcontrolgroup2.2不同稳定转染细胞的生长曲线TMZ处理后，与亲代U87细胞相比，上调surivivn表达的U87/sur细胞增殖活性明显增强(P<0.01)，而下调survivin表达的U87/sursi细胞增殖活性明显降低(P<0.01，图2)。2.3不同稳定转染细胞的克隆形成能力经100μmol/LTMZ处理后，与亲代U87细胞相比，U87/sursi细胞克隆数明显减少(P<0.01)，而U87/sur细胞克隆数明显增多(P<0.01，图3)。2.4不同稳定转染细胞的凋亡水平经TMZ处理后，与亲代U87细胞相比，U87/sursi细胞凋亡明显增多(P<0.01)，而U87/sur细胞凋亡明显减少(P<0.01，图4)。SurvivinGAPDHSursiCtrlCtrlSur200150100500Coonlyorfinmgfficeeicny%)(SursiCtrlCtrlSur(1)(1)
MedJChinPLA,Vol.42,No.10,October1,2017889图2各组U87细胞生长曲线Fig.2GrowthcurveofU87cellsineachgroup(1)P<0.01comparedwithTMZgroup图3各组U87细胞克隆形成率Fig.3ColonyformingrateofU87cellsineachgroup(1)P<0.01comparedwithTMZgroup2.5不同稳定转染细胞的活化caspase-3表达水平Westernblotting检测结果显示，经TMZ处理后，与亲代U87细胞相比，U87/sursi细胞中活化caspase-3蛋白表达水平明显增加(P<0.01)，而U87/sur细胞中活化caspase-3表达水平明显降低(P<0.01，图5)。3讨论胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发肿瘤，约占颅内肿瘤的35%，具有极强的侵袭性及较高的致图4各组U87细胞凋亡水平Fig.4ApoptosisrateofU87cellsineachgroup(1)P<0.01comparedwithTMZgroup图5各组U87细胞活化caspase-3表达水平(Westernblotting)Fig.5Expressionofactivatedcaspase-3ofU87cellsineachgroup(Westernblotting)(1)P<0.01comparedwithTMZgroup死率。胶质母细胞瘤占胶质瘤的55%，即使经过手术、放疗及化疗，其预后依然不容乐观，患者的中位生存时间仅为12~15个月，是5年存活率较低的肿瘤之一[10-12]。胶质瘤患者术后进行TMZ同步及辅助化疗是其标准治疗方案，可显著提高生存期[13]。但是耐药性的产生降低了TMZ的疗效，而胶质瘤细胞如何获得对TMZ的耐药性尚未完全明了，严重影响了胶质瘤的治疗效果，因此研究胶质瘤细胞对TMZ耐药的机制具有重要的临床意义。既往研究提示凋亡在肿瘤的发生及治疗中具有重要作用[14-15]，化疗或放疗导致的肿瘤细胞死亡主要是通过激活细胞凋亡实现的，因此凋亡抗性是肿瘤细胞化疗耐药的一个重要机制[16-18]。Survivin具有多种功能，在细胞的关键进程中发挥重要作用，如凋亡、细?
MedJChinPLA,Vol.42,No.10,October1,2017889图2各组U87细胞生长曲线Fig.2GrowthcurveofU87cellsineachgroup(1)P<0.01comparedwithTMZgroup图3各组U87细胞克隆形成率Fig.3ColonyformingrateofU87cellsineachgroup(1)P<0.01comparedwithTMZgroup2.5不同稳定转染细胞的活化caspase-3表达水平Westernblotting检测结果显示，经TMZ处理后，与亲代U87细胞相比，U87/sursi细胞中活化caspase-3蛋白表达水平明显增加(P<0.01)，而U87/sur细胞中活化caspase-3表达水平明显降低(P<0.01，图5)。3讨论胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发肿瘤，约占颅内肿瘤的35%，具有极强的侵袭性及较高的致图4各组U87细胞凋亡水平Fig.4ApoptosisrateofU87cellsineachgroup(1)P<0.01comparedwithTMZgroup图5各组U87细胞活化caspase-3表达水平(Westernblotting)Fig.5Expressionofactivatedcaspase-3ofU87cellsineachgroup(Westernblotting)(1)P<0.01comparedwithTMZgroup死率。胶质母细胞瘤占胶质瘤的55%，即使经过手术、放疗及化疗，其预后依然不容乐观，患者的中位生存时间仅为12~15个月，是5年存活率较低的肿瘤之一[10-12]。胶质瘤患者术后进行TMZ同步及辅助化疗是其标准治疗方案，可显著提高生存期[13]。但是耐药性的产生降低了TMZ的疗效，而胶质瘤细胞如何获得对TMZ的耐药性尚未完全明了，严重影响了胶质瘤的治疗效果，因此研究胶质瘤细胞对TMZ耐药的机制具有重要的临床意义。既往研究提示凋亡在肿瘤的发生及治疗中具有重要作用[14-15]，化疗或放疗导致的肿瘤细胞死亡主要是通过激活细胞凋亡实现的，因此凋亡抗性是肿瘤细胞化疗耐药的一个重要机制[16-18]。Survivin具有多种功能，在细胞的关键进程中发挥重要作用，如凋亡、细?
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