HMGB1对拟缺血rBMECs上P-gp的调节作用研究
发布时间：2020-12-20 15:11
目的:探讨拟缺血损伤星形胶质细胞中HMGB1的变化情况以及对共培养体系中大鼠脑微血管内皮细胞（Rat brain microvascular endothelial cells,rBMECs）上P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）的影响及相关机制。方法:1、取出生一周内的SD大鼠原代培养星形胶质细胞、脑微血管内皮细胞,倒置显微镜下观察细胞的形态、免疫荧光染色法鉴别星形胶质细胞。2、取不同浓度的Na2S2O4溶液作用于原代培养的星形胶质细胞,MTT法检测拟缺血6 h后神经胶质细胞的存活率。3、借助transwell技术建立星形胶质细胞与rBMECs共培养体系,筷式电极测定共培养体系10-11天内跨膜电阻（Transendothelial electrical resistance,TEER）的变化,待TEER稳定后用于后续实验。不同浓度的Na2S2O4溶液损伤星形胶质细胞后,采用全波长酶标仪检测transwell外室荧光素钠（Fluoresc...
【文章来源】：河南大学河南省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
荧光显微镜下星形胶质细胞的形态（400×）
Fig 1-2 Identification of astrocytes（400×）4.3 Na2S2O4对于星形胶质细胞的激活与损伤作用不同浓度的 Na2S2O4作用于星形胶质细胞 6 h，细胞的存活率不同。各组细胞的 MTT吸光度值和细胞存活率见于表1-1、图1-3。其中终浓度为1 mM、1.5 mM、2 mM的Na2S2O4损伤后细胞存活率分别为 94.35%、86.74%、88.85%，与 control 相比无显著性差异；而终浓度为 2.5 mM、3 mM、3.5 mM、3.75 mM、4 mM 的 Na2S2O4损伤细胞后，细胞存活率分别为 76.04%、70.37%、68.93%、46.47%、41.00%与 control 相比有显著性差异。因为神经胶质细胞达到一定的损伤程度的时候才会引起 P-gp 的变化，所以本实验选择 3mM、3.5 mM、3.75 mM、4 mM 的 Na2S2O4进行下一步的实验。图 1-2 星形胶质细胞的鉴别（400×）
表 1-1 Na2S2O4对神经胶质细胞损伤（ x±s, n=4)Tab 1-1 The neurogliocyte cells injury induced by Na2S2O4（ x±s, n=4)Group(mM) A570Cell survive rate（%）control 0.62±0.04 1001 0.58±0.02 94.351.5 0.52±0.03 86.742 0.52±0.01 88.852.5 0.47±0.02 76.04*3 0.43±0.01 70.37*3.5 0.43±0.03 68.93*3.75 0.29±0.04 46.47*4.0 0.25±0.05 41.00*Note: *: p＜0.05 vs.control group
【参考文献】：
期刊论文
[1]Overexpression of HMGB1 A-box reduced lipopolysaccharide-induced intestinal inflammation via HMGB1/TLR4 signaling in vitro[J]. Fu-Cai Wang,Jing-Xuan Pei,Jun Zhu,Nan-Jin Zhou,Dong-Sheng Liu,Hui-Fang Xiong,Xiao-Qun Liu,Dong-Jia Lin,Yong Xie. World Journal of Gastroenterology. 2015(25)
[2]雪白睡莲花中黄酮类成分抗氧化及拟缺血对神经细胞作用的研究[J]. 刘瑞凝,王伟,谢伟东,丁怡,杜力军. 世界科学技术. 2006(05)
[3]细胞模型发展现状及应用于中药研究的探讨[J]. 王春梅,乔延江. 世界科学技术. 2004(03)
硕士论文
[1]HMGB1、RAGE及TLR4在脑梗死大鼠脑组织的动态表达及丹参酮ⅡA的神经保护作用[D]. 王力娜.河北医科大学 2010
本文编号：2928082
【文章来源】：河南大学河南省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
荧光显微镜下星形胶质细胞的形态（400×）
Fig 1-2 Identification of astrocytes（400×）4.3 Na2S2O4对于星形胶质细胞的激活与损伤作用不同浓度的 Na2S2O4作用于星形胶质细胞 6 h，细胞的存活率不同。各组细胞的 MTT吸光度值和细胞存活率见于表1-1、图1-3。其中终浓度为1 mM、1.5 mM、2 mM的Na2S2O4损伤后细胞存活率分别为 94.35%、86.74%、88.85%，与 control 相比无显著性差异；而终浓度为 2.5 mM、3 mM、3.5 mM、3.75 mM、4 mM 的 Na2S2O4损伤细胞后，细胞存活率分别为 76.04%、70.37%、68.93%、46.47%、41.00%与 control 相比有显著性差异。因为神经胶质细胞达到一定的损伤程度的时候才会引起 P-gp 的变化，所以本实验选择 3mM、3.5 mM、3.75 mM、4 mM 的 Na2S2O4进行下一步的实验。图 1-2 星形胶质细胞的鉴别（400×）
表 1-1 Na2S2O4对神经胶质细胞损伤（ x±s, n=4)Tab 1-1 The neurogliocyte cells injury induced by Na2S2O4（ x±s, n=4)Group(mM) A570Cell survive rate（%）control 0.62±0.04 1001 0.58±0.02 94.351.5 0.52±0.03 86.742 0.52±0.01 88.852.5 0.47±0.02 76.04*3 0.43±0.01 70.37*3.5 0.43±0.03 68.93*3.75 0.29±0.04 46.47*4.0 0.25±0.05 41.00*Note: *: p＜0.05 vs.control group
【参考文献】：
期刊论文
[1]Overexpression of HMGB1 A-box reduced lipopolysaccharide-induced intestinal inflammation via HMGB1/TLR4 signaling in vitro[J]. Fu-Cai Wang,Jing-Xuan Pei,Jun Zhu,Nan-Jin Zhou,Dong-Sheng Liu,Hui-Fang Xiong,Xiao-Qun Liu,Dong-Jia Lin,Yong Xie. World Journal of Gastroenterology. 2015(25)
[2]雪白睡莲花中黄酮类成分抗氧化及拟缺血对神经细胞作用的研究[J]. 刘瑞凝,王伟,谢伟东,丁怡,杜力军. 世界科学技术. 2006(05)
[3]细胞模型发展现状及应用于中药研究的探讨[J]. 王春梅,乔延江. 世界科学技术. 2004(03)
硕士论文
[1]HMGB1、RAGE及TLR4在脑梗死大鼠脑组织的动态表达及丹参酮ⅡA的神经保护作用[D]. 王力娜.河北医科大学 2010
本文编号：2928082
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