PGC-1α过表达逆转OGD/R诱导的神经元线粒体功能降低和凋亡

发布时间：2021-05-17 15:26

　　目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α（PGC-1α）基因过表达对氧糖剥夺/复氧（OGD/R）诱导的神经元线粒体功能及细胞凋亡的影响。方法:采用RT-PCR的方法从C57BL/6乳鼠大脑皮层获取PGC-1α的全基因序列,并克隆到真核表达载体p EGFP-N1上,经PCR初步鉴定后转染原代皮层神经元,Western blot鉴定PGC-1α的表达情况,成功构建PGC-1α真核表达载体p EGFP-N1-PGC-1α。分别将转染p EGFP-N1和p EGFP-N1-PGC-1α载体的皮层神经元进行OGD/R处理,分别采用Mito Tracker Red染色、流式细胞术、ATP代谢检测试剂盒和TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测线粒体质量分数、活性氧簇（ROS）和ATP生成、细胞凋亡以及caspase-3激活的变化。结果:PGC-1α过表达可抑制OGD/R诱导的神经元线粒体生成能力的降低和ROS的生成（P<0.05）,增强ATP的合成能力（P<0.01）,抑制神经元的凋亡（P<0.01）并降低caspase-3的激活（P<0.05）。结论:PGC-1α过... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2017,33(11)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材料和方法
    1 材料和试剂
    2 方法
        2.1 载体构建及转染
        2.2 原代神经元培养
        2.3 构建氧糖剥夺/复氧模型
        2.4 线粒体质量分数检测
        2.5 ROS及ATP含量的检测
        2.6 TUNEL检测细胞凋亡
        2.7 Western blot实验
    3 统计数据处理
结果
    1 PGC-1α过表达质粒的构建
    2 PGC-1α过表达对OGD/R诱导的神经元线粒体质量和功能的影响
    3 PGC-1α过表达对OGD/R诱导神经元凋亡的影响
    4 PGC-1α过表达对凋亡执行蛋白表达的影响
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]线粒体生成与脑缺血再灌注损伤的研究进展[J]. 王来,祝世功.  中国病理生理杂志. 2016(08)
[2]pEGFP-N1-VirB8真核表达载体的构建及其在大鼠脑内的表达[J]. 马晓娟,刘爱翠,马巧丽,王钊,王振海.  宁夏医科大学学报. 2016(04)
[3]大豆异黄酮对脑缺血/再灌注诱导的线粒体损伤和脑细胞凋亡的影响[J]. 赵士弟,陈耀,姜丽娜,董银凤,陈前芬.  中国病理生理杂志. 2014(12)
[4]pEGFP-HSP70重组质粒的构建及其在大鼠神经干细胞中的表达[J]. 舒晓明,逯丹,王珍,张婵娟,赵佳仪,朱丽红,戚仁斌,陆大祥.  中国病理生理杂志. 2014(05)
[5]Nrf2过表达对乙醇刺激下肝星状细胞激活与增殖及合成Ⅰ型胶原的影响[J]. 刘曼,何月,张吉翔.  中国病理生理杂志. 2013(09)



本文编号：3192000