HDAC6-p97/VCP调控“泛素化—自噬通路”逆转胶质母细胞瘤内质网应激耐受的相关机制研究

发布时间：2021-05-28 16:00

　　目的:1.明确组蛋白脱乙酰化酶抑制剂Tubastatin A协同替莫唑胺对胶质瘤细胞耐药株的杀伤作用;2.探讨组蛋白脱乙酰化酶抑制剂Tubastatin A协同替莫唑胺杀伤胶质瘤细胞耐药株的机制。材料与方法:构建四种不同胶质瘤细胞系耐药株,预先用Tubastatin A处理后,采用CCK-8法、Caspase-3凋亡检测法、Hoechst 33342/PI双染法及Tunel法检测细胞活力及凋亡状态。采用蛋白质印记实验及免疫共沉淀实验检测各个细胞系中组蛋白脱乙酰化酶6相关细胞信号通路的基因表达情况及相应分子之间作用。实验数据均采用SPSS19统计软件进行数据分析处理,所有定量实验至少独立重复3次,图中的数据为平均值±标准差（mean±S.D.）。多组样本方差假设相同市采用独立样本t检验,多组样本方差明显不同时,在用Bonferroni实验矫正后采用Anova检验。P<0.05为差异具有统计学意义。结果:1.Western blotting结果显示:GRP78,磷酸化IRE1α,HDAC6在肿瘤组织样本的表达水平高于正常脑组织中的表达水平;p97/VCP在肿瘤组织样本的表达水平低于正... 

【文章来源】：广州医科大学广东省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 细胞培养
    2.3 药物作用
    2.4 CCK-8 法测定不用加药方式对四系细胞的生长抑制率
    2.5 Caspase-3 活性检测实验测定各个细胞系凋亡状况
    2.6 Hoechst 33342/PI双染法检测细胞凋亡情况
    2.7 Tunel法检测细胞凋亡情况
    2.8 细胞蛋白提取及蛋白浓度测定
    2.9 Western blotting法检测细胞内各基因表达情况
    2.10 免疫共沉淀检测方法
    2.11 免疫荧光细胞化学染色
    2.12 实时定量PCR分析
    2.13 细胞转染
第三章 结果
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
发表论文情况


【参考文献】：
期刊论文
[1]基质金属蛋白酶抑制剂对胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞体外侵袭抑制作用的比较[J]. 谢蕊繁,张所军,高宝成,万锋,郭东生,雷霆.  中华实验外科杂志. 2010 (10)



本文编号：3208336