神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂对脑出血致血脑屏障损伤的作用研究
发布时间：2021-07-11 08:46
自发性脑出血（Intracerebral hemorrhage, ICH）在我国占急性脑血管病的30%左右,急性期病死率约为30%-40%,是急性脑血管病中最高的,具有高发病率、高致残率、高死亡率的特点。血脑屏障（Blood-brain barrier, BBB）损伤是脑出血后水肿形成的重要机制之一,而脑水肿是脑出血患者病情恶化和死亡的重要原因,控制脑水肿降低颅内压是脑出血治疗的重点之一。Zhang等人研究发现外源性神经元性丝氨酸蛋白酶抑制剂（Neuroserpin, NSP）能够减少脑缺血后脑血管通透性的增加从而减少BBB损伤。目前国内外关于NSP在缺血性卒中及癫痫等疾病中的神经保护作用已有诸多研究,但罕有脑出血中NSP作用的相关研究,我们希望通过实验探讨NSP在脑出血中对BBB的影响,寻找脑出血临床治疗的新策略。本课题首先通过免疫荧光、Western blot观察比较脑出血小鼠在干预后24h/48h/72h不同时间点血肿周边脑组织NSP蛋白较空白对照及假手术组表达变化情况,并分析其随时间变化趋势；然后通过神经功能缺损评分、干湿重法测定脑组织含水量、伊文思蓝（Evans blue, ...
【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
血脑屏障结构图；B:紧密连接结构图
图1-1脑出血模型制备及脑组织标本注：A:脑出血建模；B:纹状体骨面定位；C:纹状体定位示意图；D:假手术模型脑组织标本冠状切面；E:脑出血模型脑组织标本冠状切面；F:脑出血模型标本侧面观3.实验分组
图1-5 Western blot转膜夹板安装示意图春红染色：PVDF膜从转膜仪中取出后右上角减角做标记，置于丽中，约5分钟后显色。用转膜液洗净后照相。再用1*TBST洗3次，直至脱色。闭：PVDF膜置于5%脱脂牛奶中，摇床七缓慢摇动，室温封闭Ih。入兔源性NSP —抗(ab33077，1:250)和小鼠源性p-tubulin —抗(KC5704°(：_育过夜。TBST洗3次，每次lOmin。加入HRP标记的山羊抗兔二抗(CW010山羊抗小鼠一-抗(CW0102，1:10000),室温孵育Ih。_育后TBST洗10 min。学发光法(ECL)显影：ECL发光试剂盒中A、B液等体积混合制备（现用现配），均滴加在洗潘好的PVDF膜正面，立即放入暗盒中象扫描及积分光密度值测定：免疫印迹的图谱由数码相机拍照，
【参考文献】：
期刊论文
[1]The Effects of Electromagnetic Pulse on the Protein Levels of Tight Junction Associated-Proteins in the Cerebral Cortex,Hippocampus,Heart,Lung,and Testis of Rats[J]. QIU LianBo 1,CHEN Chen 1,DING GuiRong 2,ZHOU Yan 2,and ZHANG MengYao 3 1.Department of Blood Transfusion,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,Shannxi,China 2.Department of Radiation Medicine,Faculty of Preventive Medicine,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,Shannxi,China 3.Department of Chemistry,School of Pharmacy,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,Shannxi,China. Biomedical and Environmental Sciences. 2011(04)
[2]神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂在大鼠小胶质细胞缺氧/复氧模型上的作用[J]. 杨雪莲,董强,刘玲,王亮. 复旦学报(医学版). 2011(03)
[3]神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂在神经元缺氧复氧损伤中的保护作用[J]. 杨雪莲,董强,王亮,任惠民. 中国临床神经科学. 2008(06)
[4]《中国脑血管病防治指南》摘要(四)[J]. 饶明俐. 中风与神经疾病杂志. 2006(02)
本文编号：3277757
【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
血脑屏障结构图；B:紧密连接结构图
图1-1脑出血模型制备及脑组织标本注：A:脑出血建模；B:纹状体骨面定位；C:纹状体定位示意图；D:假手术模型脑组织标本冠状切面；E:脑出血模型脑组织标本冠状切面；F:脑出血模型标本侧面观3.实验分组
图1-5 Western blot转膜夹板安装示意图春红染色：PVDF膜从转膜仪中取出后右上角减角做标记，置于丽中，约5分钟后显色。用转膜液洗净后照相。再用1*TBST洗3次，直至脱色。闭：PVDF膜置于5%脱脂牛奶中，摇床七缓慢摇动，室温封闭Ih。入兔源性NSP —抗(ab33077，1:250)和小鼠源性p-tubulin —抗(KC5704°(：_育过夜。TBST洗3次，每次lOmin。加入HRP标记的山羊抗兔二抗(CW010山羊抗小鼠一-抗(CW0102，1:10000),室温孵育Ih。_育后TBST洗10 min。学发光法(ECL)显影：ECL发光试剂盒中A、B液等体积混合制备（现用现配），均滴加在洗潘好的PVDF膜正面，立即放入暗盒中象扫描及积分光密度值测定：免疫印迹的图谱由数码相机拍照，
【参考文献】：
期刊论文
[1]The Effects of Electromagnetic Pulse on the Protein Levels of Tight Junction Associated-Proteins in the Cerebral Cortex,Hippocampus,Heart,Lung,and Testis of Rats[J]. QIU LianBo 1,CHEN Chen 1,DING GuiRong 2,ZHOU Yan 2,and ZHANG MengYao 3 1.Department of Blood Transfusion,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,Shannxi,China 2.Department of Radiation Medicine,Faculty of Preventive Medicine,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,Shannxi,China 3.Department of Chemistry,School of Pharmacy,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,Shannxi,China. Biomedical and Environmental Sciences. 2011(04)
[2]神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂在大鼠小胶质细胞缺氧/复氧模型上的作用[J]. 杨雪莲,董强,刘玲,王亮. 复旦学报(医学版). 2011(03)
[3]神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂在神经元缺氧复氧损伤中的保护作用[J]. 杨雪莲,董强,王亮,任惠民. 中国临床神经科学. 2008(06)
[4]《中国脑血管病防治指南》摘要(四)[J]. 饶明俐. 中风与神经疾病杂志. 2006(02)
本文编号：3277757
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/shenjingyixue/3277757.html
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