miR-103-3p通过靶向作用于Caveolin-1影响蛛网膜下腔出血后血脑屏障完整性及神经功能

发布时间：2017-04-26 06:01

  本文关键词：miR-103-3p通过靶向作用于Caveolin-1影响蛛网膜下腔出血后血脑屏障完整性及神经功能，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage, SAH)具有高死亡率和高致残率的特点,SAH后血脑屏障的破坏是影响其预后的关键环节。本文旨在探究miR-103-3p是否能影响SAH后血脑屏障的通透性及神经功能,并探索其分子机制。方法首先我们在体外培养小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd3),利用荧光素酶标记实验证明miR-103-3p与Caveolin-13'非编码区是否相互作用。然后向bEnd3细胞中导入miR-103-3p模拟剂或拮抗剂从而过表达或者抑制miR-103-3p,利用qPCR技术,western blot技术及免疫荧光技术观察Caveolin-1,紧密连接蛋白ZO-1及Occludin的表达情况。接着我们利用刺破法制造大鼠SAH模型,然后将大鼠分为假手术组,miR-103-3p阴性对照组及miR-103-3p抑制剂组。在SAH术前一天侧脑室给予miR-103-3p阴性对照剂或者miR-103-3p抑制剂,SAH术后24小时利用qPCR技术及western blot技术检测miR-103-3p, Caveolin-1及紧密连接蛋白的表达情况；利用免疫组化技术观察血脑屏障破坏情况；利用改良Garcia评分及平衡木实验评估SAH术后1、3、5、7、14及28天感觉,运动和前庭功能。结果miR-103-3p能和Caveolin-13'非编码区相互作用从而抑制Caveolin-1的表达,抑制或者过表达miR-103-3p能够引起Caveolin-1及紧密连接相关蛋白ZO-1和Occludin表达量的改变。miR-103-3p在SAH术后6小时及24小时表达明显上调,而Caveolin-1表达明显下降。SAH术前24小时给予miR-103-3p抑制剂能够显著增加SAH术后Caveolin-1及紧密连接蛋白的表达,减轻SAH术后血脑屏障的破坏,改善SAH术后1、3、5、7、14及28天感觉,运动和前庭功能。结论miR-103-3p能够显著抑制Caveolin-1的表达。miR-103-3p抑制剂能够通过增加SAH术后Caveolin-1的表达从而减轻SAH术后血脑屏障的破坏,改善SAH术后神经功能缺损。
【关键词】：mR-103-3p Caveolin-1 蛛网膜下腔出血 血脑屏障 神经功能缺损
【学位授予单位】：南京大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R743.35
【目录】：

• 中英文对照缩略词表6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 绪论11-13
• 第一章 研究miR-103-3p对Caveolin-1是否具有表达调控作用13-23
• 引言13
• 材料与方法13-16
• 结果16-20
• 讨论20-22
• 结论22-23
• 第二章 研究miR-103-3p抑制剂对SAH后血脑屏障通透性及神经功能的影响23-33
• 引言23
• 材料与方法23-27
• 结果27-31
• 讨论31-32
• 结论32-33
• 全文总结33-34
• 参考文献34-37
• 致谢37-38
• 附录一 综述38-50
• 参考文献45-50
• 附录二 硕士期间科研成果50-51

【参考文献】

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1 Wang-Xia Wang;Robert J.Danaher;Craig S.Miller;Joseph R.Berger;Vega G.Nubia;Bernard S.Wilfred;Janna H.Neltner;Christopher M.Norris;Peter T.Nelson;;Expression of miR-15/107 Family MicroRNAs in Human Tissues and Cultured Rat Brain Cells[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2014年01期

  本文关键词：miR-103-3p通过靶向作用于Caveolin-1影响蛛网膜下腔出血后血脑屏障完整性及神经功能，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：327844