IL-1β和TNF-α对原代培养的腹侧中脑神经元铁代谢的调控机制研究

发布时间：2021-08-17 19:16

　　帕金森病（Parkinson’s disease, PD）是一种常见的中枢神经系统退行性疾病,临床表现主要有静止性震颤、肌僵直和运动减少等症状。其主要病理学基础为黑质（substantia nigra, SN）多巴胺（dopamine, DA）能神经元的脱失以及继发引起的纹状体DA含量下降。迄今为止,PD的发病原因仍未完全明了,遗传、环境、年龄因素导致的如神经炎症、铁代谢异常、线粒体功能障碍、蛋白异常聚集等都被认为参加了PD的发病。神经炎症反应主要表现为小胶质细胞的激活和炎性因子如白细胞介素1β（interleukin 1β,IL-1β）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）的大量释放。尸检结果和动物实验证实在PD病人和动物模型的SN和纹状体区域IL-1β和TNF-α的含量升高；将IL-1β和TNF-α直接注射至脑内可以引起DA能神经元的凋亡,而阻断IL-1β和TNF-α的受体可以缓解6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）和1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
材料和方法
    1. 腹侧中脑神经元的原代培养
    2. 小胶质细胞的原代培养
    3. 免疫荧光方法鉴定腹侧中脑神经元和小胶质细胞的纯度
    4. IL-1β和TNF-α处理后VM神经元摄铁和铁转出功能的检测
    5. IL-1β和TNF-α处理的VM神经元DMT1+IRE, FPN1和IRP1蛋白的表达变化
    6. IL-1β和TNF-α处理的VM神经元DMTI+IRE和FPN1 mRNA的表达变化
    7. IL-1β和TNF-α处理的VM神经元Hepcidin mRNA水平的表达变化
    8. 细胞内活性氧物质(reactive oxide species,ROS)的检测
    9 神经元培养基中一氧化氮(nitric oxide,NO)的检测
    10. FAC,DFO和LPS处理后小胶质细胞释放炎性因子含量的检测
    11. 统计学处理
结果
    1. 免疫荧光技术鉴定原代培养的神经元和小胶质细胞的纯度
    2. IL-1β和TNF-α对VM神经元摄铁和铁转出功能的影响
    3. IL-1β和TNF-α对VM神经元中DMT1+IRE和FPN1表达的影响
    4. IL-1β和TNF-α对VM神经元中铁调节蛋白(IRP1)的表达变化
    5. IL-1β和TNF-α对VM神经元中ROS和NO生成的影响
    6. ROS和NO对VM神经元中IRP1蛋白表达的影响
    7. 不同铁状态对小胶质细胞释放IL-1β和TNF-α的影响
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]高氧对脂多糖诱导N9小胶质细胞促炎症作用的影响[J]. 蒋朴,徐颖,刘杨,黄雪竹,幸宇,邓世雄.  细胞与分子免疫学杂志. 2012(03)
[2]MPTP诱导小鼠黑质区铁摄取和DMT1表达增加[J]. 姜宏,钱忠明,谢俊霞.  生理学报. 2003(05)



本文编号：3348338