基于ERK1/2信号通路探讨解毒化瘀对凝血酶合并缺氧诱导PC12细胞损伤的干预作用及机制

发布时间：2023-11-11 12:13

　　目的:探索凝血酶合并缺氧对PC12细胞损伤的最佳反应时间点,建立体外缺氧合并凝血酶诱导的PC12细胞损伤模型,模拟急性缺血性中风时凝血酶合并缺氧毒性损伤的细胞内环境。探讨急性缺血性中风(Acute Ischemic Stroke,AIS)引起的脑细胞损伤的分子机制及解毒化瘀方对凝血酶合并缺氧损伤的干预作用与Ras/Raf/撕裂原激活蛋白激酶(mitogenactivatedp rotein kinase kinase,MEK)/细胞外信号调节激酶(Extracellular singnal-regulated Kinase,ERK)信号转导通路的作用机制。方法:采用三气培养箱和无血清(Dulbeccos Modified Eagle Medium DMEM)高糖型培养液合并不同浓度的凝血酶(0、50、100、150和200U/ml)造成细胞损伤后,再将每组缺氧状态下培养1h、6h、12h、24h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)分析细胞的存活率、TUNEL法检测细胞的凋亡程度,筛选出凝血酶合并缺氧对PC12细胞损伤的最佳模型条件,建立凝血酶合并缺氧的体外细胞模型。将PC12细胞随机分为空白...

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
英语缩略词表
前言
材料与方法
    1.实验材料
        1.1 实验细胞
        1.2 实验动物
        1.3 药物
        1.4 试剂
        1.5 主要仪器
    2. 实验方法
        2.1 解毒化瘀方含药血浆的制备
        2.2 凝血酶合并缺氧诱导PC12细胞损伤模型的建立
        2.3 指标检测
        2.4 统计学方法
    3.结果
        3.1 细胞模型的筛选和确定
        3.2 解毒化瘀方对凝血酶合并缺氧细胞毒性损伤的干预作用
    4 讨论
        4.1 西医对AIS的认识
        4.2 凝血酶在AIS中的作用
        4.3 凝血酶受体
        4.4 凝血酶毒性损伤相关信号通路
        4.5 传统医学对AIS的认识
        4.6 解毒化瘀方的立方依据及用药分析
        4.7 解毒化瘀方对凝血酶及其受体与ERK信号通路的影响
结论
致谢
参考文献
附图 A：经NGF诱导具有神经元形态的 PC12 细胞
附图 B 150U/ml 凝血酶在缺氧 1h、6h、12h、24h 后细胞凋亡情况（绿色荧光为凋亡细胞）
附图 C：各组细胞 PAR-1、MEK-1、ERK-1、ERK-2 的 m RNA 表
附录 D：免疫荧光相关信号通路 ERK1/2、p-ERK1/2 蛋白表达
附录 E：综述
    参考文献



本文编号：3862573