REST4对胶质细胞瘤U87细胞生物学行为的影响及其作用机制

发布时间：2024-09-17 15:36

　　 目的探讨抑制元素l-沉默转录因子4(repressor element 1-silencing transcription factor 4,REST4)基因对胶质细胞瘤U87细胞增殖、凋亡、迁移的影响及可能的作用机制。方法将REST4-siRNA转染至胶质细胞瘤U87细胞(si-REST4组),同时设置siRNA阴性对照组(si-NC组)及空白对照组(Control组)。采用实时荧光定量PCR检测REST4 mRNA的表达水平,MTT法检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测U87细胞中REST4、PI3K、AKT、mTOR、p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白的表达水平。结果转染后,与Control组及si-NC组相比,si-REST4组U87细胞中REST4 mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.05),细胞增殖能力降低(P<0.05),细胞凋亡比例增加(P<0.05),细胞迁移率降低(P<0.05)。Western blot检测结果显示,与Control组及si...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要材料
    1.2 细胞培养与转染
    1.3 实时荧光定量PCR检测U87细胞中REST4 m RNA的表达
    1.4 MTT法检测U87细胞的增殖能力
    1.5 Annexin V-FITC/PI双染法检测U87细胞凋亡情况
    1.6 划痕实验检测U87细胞的迁移能力
    1.7 Western blot检测U87细胞中PI3K/AKT/m TOR信号通路相关因子的表达水平
    1.8 统计学方法
2 结果
    2.1 转染后U87细胞中REST4 m RNA及蛋白表达水平
    2.2 下调REST4对U87细胞增殖能力的影响
    2.3 下调REST4对U87细胞凋亡的影响
    2.4 REST4对U87细胞迁移能力的影响
    2.5 REST4对U87细胞PI3K/AKT/m TOR信号通路相关蛋白表达水平的影响
3 讨论



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