FUS/circ 0 02136/miR-138-5p/SOX13反馈环调节胶质瘤血管新生的机制

发布时间：2025-01-17 14:39

　　目的:脑胶质瘤是人类中枢神经系统中最常见的原发性肿瘤。尽管目前在手术、化疗和放疗方面取得了很多进展,但恶性脑胶质瘤患者预后仍然很差。脑胶质瘤依赖于肿瘤血管生长。胶质瘤细胞分泌血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）等多种促血管生成因子促进血管内皮细胞的生长;胶质瘤血管内皮细胞也分泌多种促进肿瘤生长的因子,二者相互作用促进胶质瘤的生长。因此抗血管新生的治疗已成为抗胶质瘤的重要治疗手段之一。深入研究胶质瘤血管新生可能为胶质瘤的治疗提供新途径。FUS是一种RNA结合蛋白（RNA-binding proteins,RBPs）,属于FET（FUS/EWS/TAF15）蛋白家族,参与调节细胞内RNA转运,信使RNA（messenger RNA,mRNA）合成,选择性剪接和多腺苷酸化位点选择等。FUS参与肿瘤等疾病发生发展的调控。例如,FUS与转录因子ERG结合,调节急性髓性白血病的发展。此外,在脂肪肉瘤、乳腺癌、宫颈癌等细胞中发现FUS的mRNA或蛋白表达增加。FUS能够促进非小细胞肺癌的恶性进展。FUS的表达沉默抑制神经母细胞瘤细胞的增殖和...

【文章页数】：86 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验细胞株
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 细胞冻存
        2.2.3 细胞复苏
        2.2.4 细胞计数
        2.2.5 胶质母细胞瘤(GBM)条件培养基的制备
        2.2.6 Trizol法提取RNA
        2.2.7 实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)
        2.2.8 细胞转染
        2.2.9 细胞生长抑制实验(CCK-8 法)
        2.2.10 细胞迁移实验
        2.2.11 内皮细胞管腔形成实验
        2.2.12 Western blot实验
        2.2.13 荧光素酶报告基因实验
        2.2.14 RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验
        2.2.15 染色质免疫共沉淀(ChIP)实验
        2.2.16 基质胶栓体内血管生成实验
    2.3 统计方法
3 结果
    3.1 FUS在 GECs中高表达,FUS表达沉默抑制胶质瘤血管新生,FUS结合并促进circ₀02136 的生成,调节胶质瘤血管新生
    3.2 Circ₀02136在GECs中高表达,circ₀02136 的表达沉默抑制胶质瘤血管新生
    3.3 MiR-138-5p在 GECs中低表达,过表达miR-138-5p抑制胶质瘤血管新生
    3.4 MiR-138-5p靶向结合circ₀02136,调节胶质瘤血管新生
    3.5 SOX13是miR-138-5p的靶基因,促进胶质瘤血管新生
    3.6 SOX13与SPON2 启动子区结合,促进SPON2 的表达
    3.7 MiR-138-5p通过SOX13 影响SPON2 的表达,SOX13 促进FUS转录形成反馈环,调节胶质瘤血管新生
    3.8 FUS、circ₀02136和miR-138-5p单独及联合应用在体显著抑制胶质瘤血管新生
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：4028198