帕金森病和癌症相关蛋白DJ-1抑制TRAIL凋亡信号通路的研究

发布时间：2025-04-01 06:16

　　帕金森病(Parkinson’s Disease, PD)，是世界上发病率最高的神经退行性疾病之一，其发病率仅次于阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)，以中脑黑质纹状体多巴胺能神经元选择性缺失和存活神经元中出现特征包涵体-路易小体（lewy body）为病理特征，该病临床特征表现为运动迟缓、静止性震颤、肌强直和记忆减退等，严重危害了病人的健康并对病人家属和社会带来巨大负担。尽管帕金森病以散发性为主，其发病率随着年龄增长而显着增高，大于65岁人群中约有1%患病，大于85岁人群中患病率上升至大约5%，但是帕金森病中有相当一部分病例（约10%-15%）呈现家族性。迄今为止，已有十几个家族性帕金森病致病基因被陆续鉴定出来，其中包含了以常染色体显性遗传的α-synuclein、UCH-L1和1LRRK2，及以常染色体隐性遗传的DJ-1，PINK1，ATP13A2和parkin等。尽管帕金森病的发病机制还未明确，但结合现代医学和分子生物学的研究表明，散发性和家族性帕金森病潜在的发病机制为凋亡增多、线粒体功能失调、蛋白酶体功能受损和氧化应激增加等。 DJ-1于1997年被...

【文章页数】：71 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词
第一章 绪论
    1.1 DJ-1 与帕金森病（Parkinson’s Disease，PD）
        1.1.1 帕金森病
        1.1.2 DJ-1 基因突变与帕金森病
        1.1.3 DJ-1 结构及组织分布
        1.1.4 DJ-1 的功能
        1.1.5 帕金森病理突变体 L166P
    1.2 凋亡与帕金森病，DJ-1 与 TRAIL 信号通路
        1.2.1 细胞内途径
        1.2.2 细胞外途径
        1.2.3 凋亡与帕金森病
        1.2.4 TRAIL 信号通路
        1.2.5 DJ-1 与 TRAIL 信号通路
第二章 材料与方法
    2.1 实验所用质粒构建（plasmids construction）
    2.2 逆转录 PCR (reverse transcription-PCR，RT-PCR)
    2.3 细胞培养及质粒转染（cell culture and plasmids transfection）
    2.4 免疫细胞化学（immunocytochemistry）
    2.5 RNA 干扰（RNA interference, RNAi）
    2.6 SDS-PAGE 和免疫印迹（immunoblot analysis）
    2.7 TRAIL 处理诱导细胞凋亡
    2.8 GST-pulldown
    2.9 免疫共沉淀（co-immunocipitation, co-IP）
    2.10 MTT 法检测细胞活力（以 24 孔板为例）
    2.11 数据分析
第三章 结果与讨论
    3.1 引言
    3.2 实验结果
        3.2.1 DJ-1 抑制由 TRAIL 刺激引起的 caspase-8 启动和凋亡不依赖于 p53
        3.2.2 DJ-1 作用于启动型 caspase-8 上游
        3.2.3 DJ-1 对 TRAIL 受体的水平没有影响
        3.2.4 DJ-1 能够结合 FADD 并抑制 TRAIL 诱导的凋亡，而 L166P 却不能
        3.2.5 DJ-1 与 pro-caspase-8 竞争结合 FADD 的 DED
        3.2.6 讨论
        3.2.7 总结与展望
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文
附录



本文编号：4039047