环介导等温扩增技术检测单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型及人乳头瘤病毒6型和11型的实验研究

发布时间：2018-06-13 13:14

  本文选题：环介导等温扩增 + 单纯疱疹病毒　； 参考：《南华大学》2010年硕士论文

【摘要】： 目的:建立单纯疱疹病毒(Herpes Simple Virus)Ⅰ型和Ⅱ型、人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus)6型和11型的LAMP检测方法。 方法:分别设计扩增各型病毒特异基因的LAMP引物,提取病毒DNA,配置LAMP反应体系,60～65℃保温约60 min,完成对靶病原体基因的扩增,肉眼及电泳判定扩增结果。LAMP扩增产物经酶切进一步鉴定;设立对照组,评价LAMP方法的特异性;10倍系列稀释模板,检测LAMP技术的敏感性。 结果:实验组经LAMP后,肉眼观察到LAMP扩增产物的出现,电泳后呈LAMP特征性梯状条带,对照组均无扩增产物;HSV及HPV LAMP扩增产物经相应限制性内切酶酶切鉴定正确,特异性实验结果显示与对照组无交叉反应,具有特异性;LAMP可检测到单纯疱疹病毒Ⅰ型、单纯疱疹病毒Ⅱ型、人乳头瘤病毒6型、人乳头瘤病毒11型DNA的最低浓度分别是1 pg/μL、10 pg/μL、1 pg/μL、1 pg/μL,其敏感性与PCR相当。 结论:建立了检测单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型、人乳头瘤病毒6型和11型的LAMP检测方法,实验结果显示该法特异和敏感,有望用于临床检测。
[Abstract]:Objective: to establish a method for the detection of herpes simplex virus (Herpes simple virus) type 鈪，

本文编号：2014138