采用噬菌体展示技术筛选肠致病性大肠埃希菌EspB蛋白结合短肽的实验研究

发布时间：2018-07-04 13:46

  本文选题：肠致病大肠埃希菌 + 噬菌体展示技术　； 参考：《中国微生态学杂志》2015年12期

【摘要】：目的探讨是否能够通过噬菌体展示技术筛选与肠致病性大肠埃希菌(EPEC)关键蛋白EspB结合的短肽。方法采用体外大肠埃希菌中表达和纯化EspB蛋白情况,Western blot验证蛋白的表达;Ph.D.12-蛋氨酸噬菌体展示技术用来筛选EspB特异结合蛋白;ELISA方法用来鉴定这些特异性结合蛋白与EspB的亲和力。结果 Western blot验证从pET21b-EspB转染质粒中提取的EspB蛋白。噬菌体展示技术筛选出了噬菌体6、7、8、12候选蛋白,ELISA检测结果显示这些候选蛋白与EspB蛋白的亲和力高于对照蛋白。结论我们的数据提供了一种潜在的研究策略即通过靶向结合EspB蛋白可抑制EPEC对上皮细胞的粘附。
[Abstract]:Objective to investigate the ability of phage display to screen short peptides binding to the key protein EspB of Escherichia coli (EPEC). Methods EspB protein was expressed and purified in Escherichia coli in vitro. Western blot assay was used to identify the affinity of EspB specific binding protein to EspB by Phage display technique. Results EspB protein was extracted from pET21b-EspB transfection plasmid by Western blot. Bacteriophage display technique showed that these candidate proteins had higher affinity to EspB protein than the control protein by Elisa. Conclusion our data provide a potential strategy to inhibit the adhesion of EPEC to epithelial cells by targeting EspB protein.
【作者单位】： 广东医学院附属深圳市南山区人民医院感染科深圳市内源性感染诊治重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(81170370/H0312) 深圳市卫人委课题和南山区科技创新委课题(2012028,201303179,201302199,2011022)
【分类号】：R378

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2096267