MiR-18b通过SMAD2调节TGF-β1诱导人毛囊间充质干细胞分化为平滑肌细胞
发布时间：2020-12-04 10:38
干细胞能定向诱导分化为机体几乎所有组织中具有特定功能的终末细胞，进而修复或替代因外伤或疾病而丧失功能的组织或细胞是该领域研究的重大突破，但其准确的调控机制远未解决。本实验拟以人毛囊源性间充质干细胞（hHF-MSCs）为起始细胞，在将其诱导分化为平滑肌细胞（SMCs）的研究中，聚焦于miRNA在这一分化过程中所起的作用，并试图在miRNA的靶基因上寻找突破。材料取自引产胎儿的头皮，分离出hHF-MSCs，在对其干性及多向分化潜能做出鉴定之后，以5ng/ul TGF-β1诱导hHF-MSCs分化为SMCs，用免疫荧光、流式细胞术、Western blot、RT-PCR及qRT-PCR检测诱导后的SMCs特异性标记物表达；通过免疫荧光、qRT-PCR检测TGF-β1诱导miR-18b作用之后的hHF-MSCs向SMC分化特异性标记物的表达；通过双荧光素酶报告基因检测系统证实miR-18b在这一过程中的靶点。结果显示：1.多潜能性hHF-MSCs在TGF-β1诱导下分化为SMCs，mRNA和蛋白水平上表达α-SMA、calponin；2.在TGF-β1诱导hHF-MSCs向SMCs分化过程中，...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
胚胎干细胞分化和发育示意图
图 2 人成体干细胞群来源部位[19]囊干细胞毛囊（hair follicle，HF）是皮肤的重要的附属器之一[25]，具有三个特征明时期，生长期(anagen) 、退行期（catagen）和静止期（telogen）。早在 19，Chase[26]就提出 HF 上部的外毛根鞘囊存在的细胞群不仅能再生 HF 而且还成皮脂腺和毛囊间表皮。毛囊内有几种类型的干细胞包括表皮干细胞、间充干细胞[27]、黑素细胞干细胞[28]以及 nestin 阳性干细胞[29-30]，这些细胞群在毛的分布不同但彼此之间有重叠[19]。毛囊干细胞具有未分化性、自我更新和体殖能力强和慢周期性等成体干细胞的共性。囊间充质干细胞Jahoda[31]第一次证明 HF-MSCs 位于皮质单位（结缔组织鞘和真皮乳头）处理上，HFMSCs 在伤口愈合过程中对表皮的修复可能起作用，这类似于表皮中毛囊表皮干细胞的作用。Hoogduijn 等[19]体外比较了小鼠 BM-MSCs 和
图 3. miRNA 生成和功能[92-93]mRNA 在 RNAPol II 作用下转录为 pri-miRNA，通过 Drosha 切割形成 pre-miRNA，被运输到细胞浆进一步被 Dicer 切割形成成熟的 miRNA，再与 mRISC 结合，导致 mRNA 降解或抑制蛋白翻译。microRNAs (miRNAs)在干细胞中的特异性表达、功能的研究，揭示了miRNAs 已经成为基因表达的关键性调节因子，调控所有的生物学过程，包括ESCs、iPSCs 和成体组织干细胞的自我更新和种系特化，以及疾病如癌症[96-100]。在各种类型的干细胞中 miRNA 的不同表达模式和他们的调节作用对于临床诊断和治疗具有潜在性的作用[101]。3.3 miRNAs 和 ESCsESCs的两个重要特性——多潜能性和自我更新的维持受到一系列复杂的分子通路的严格调控，这包括染色质调节物、转录因子和ncRNAs如miRNAs[102]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Different roles of TGF-β in the multi-lineage differentiation of stem cells[J]. Ming-Ke Wang,Fan Jiang,Zhong-Min Zou,Department of Chemical Defense and Toxicology,College of Preventive Medicine,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China Ming-Ke Wang,Health Department of Unit 92371 of People’s Liberation Army,Fuding 355205,Fujian Province,China Ming-Ke Wang,Naval Medical Research Institute,Shanghai 200433,China Hui-Qin Sun,Yong-Ping Su,Institute of Combined Injury,State Key Laboratory of Trauma,Burns and Combined Injury,College of Preventive Medicine,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China Ying-Chun Xiang,Department of nephrology,Xinqiao Hospital,Chongqing 400037,China. World Journal of Stem Cells. 2012(05)
[2]胚胎干细胞来源的拟胚体分化早期血管平滑肌标志物的表达时相[J]. 韩雅玲,肖艳平,齐岩梅,康建,闫承慧. 中国应用生理学杂志. 2008(04)
本文编号：2897449
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
胚胎干细胞分化和发育示意图
图 2 人成体干细胞群来源部位[19]囊干细胞毛囊（hair follicle，HF）是皮肤的重要的附属器之一[25]，具有三个特征明时期，生长期(anagen) 、退行期（catagen）和静止期（telogen）。早在 19，Chase[26]就提出 HF 上部的外毛根鞘囊存在的细胞群不仅能再生 HF 而且还成皮脂腺和毛囊间表皮。毛囊内有几种类型的干细胞包括表皮干细胞、间充干细胞[27]、黑素细胞干细胞[28]以及 nestin 阳性干细胞[29-30]，这些细胞群在毛的分布不同但彼此之间有重叠[19]。毛囊干细胞具有未分化性、自我更新和体殖能力强和慢周期性等成体干细胞的共性。囊间充质干细胞Jahoda[31]第一次证明 HF-MSCs 位于皮质单位（结缔组织鞘和真皮乳头）处理上，HFMSCs 在伤口愈合过程中对表皮的修复可能起作用，这类似于表皮中毛囊表皮干细胞的作用。Hoogduijn 等[19]体外比较了小鼠 BM-MSCs 和
图 3. miRNA 生成和功能[92-93]mRNA 在 RNAPol II 作用下转录为 pri-miRNA，通过 Drosha 切割形成 pre-miRNA，被运输到细胞浆进一步被 Dicer 切割形成成熟的 miRNA，再与 mRISC 结合，导致 mRNA 降解或抑制蛋白翻译。microRNAs (miRNAs)在干细胞中的特异性表达、功能的研究，揭示了miRNAs 已经成为基因表达的关键性调节因子，调控所有的生物学过程，包括ESCs、iPSCs 和成体组织干细胞的自我更新和种系特化，以及疾病如癌症[96-100]。在各种类型的干细胞中 miRNA 的不同表达模式和他们的调节作用对于临床诊断和治疗具有潜在性的作用[101]。3.3 miRNAs 和 ESCsESCs的两个重要特性——多潜能性和自我更新的维持受到一系列复杂的分子通路的严格调控，这包括染色质调节物、转录因子和ncRNAs如miRNAs[102]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Different roles of TGF-β in the multi-lineage differentiation of stem cells[J]. Ming-Ke Wang,Fan Jiang,Zhong-Min Zou,Department of Chemical Defense and Toxicology,College of Preventive Medicine,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China Ming-Ke Wang,Health Department of Unit 92371 of People’s Liberation Army,Fuding 355205,Fujian Province,China Ming-Ke Wang,Naval Medical Research Institute,Shanghai 200433,China Hui-Qin Sun,Yong-Ping Su,Institute of Combined Injury,State Key Laboratory of Trauma,Burns and Combined Injury,College of Preventive Medicine,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China Ying-Chun Xiang,Department of nephrology,Xinqiao Hospital,Chongqing 400037,China. World Journal of Stem Cells. 2012(05)
[2]胚胎干细胞来源的拟胚体分化早期血管平滑肌标志物的表达时相[J]. 韩雅玲,肖艳平,齐岩梅,康建,闫承慧. 中国应用生理学杂志. 2008(04)
本文编号：2897449
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