弓形虫P30乳酸球菌口服疫苗免疫效果研究及弓形虫ROP2-P30基因工程复合抗原的构建
发布时间：2020-12-09 04:07
本课题基于本室与复旦大学生化与分子生物学实验室共同研制成功弓形虫P30乳酸球菌（Lactococcus lactis／P30）口服疫苗基础上的延伸工作，在研究的第一部分对弓形虫P30乳酸球菌口服疫苗的实际免疫效果进行考察，第二部分利用基因工程手段构建弓形虫ROP2-P30复合抗原。 目的：1．课题研究的第一部分观察弓形虫P30乳酸球菌口服疫苗（L．lactis／P30）的免疫效果。首先确定L．lactis／P30免疫小鼠产生免疫保护性的适宜剂量，在此剂量下考查L．lactis／P30口服免疫在小鼠体内诱导的体液免疫反应，以及产生的保护性效果，进一步分析L．lactis／P30口服免疫诱导小鼠产生的细胞免疫效果和抗体IgG的动态发生过程，最后观察L．lactis／P30口服免疫鼠血清中，细胞因子IFN-γ、IL-2及NO分子的变化情况。2．本研究课题的第二部分致力于弓形虫病复合型疫苗的研制，以进一步提高弓形虫P30乳酸球菌口服疫苗的免疫保护性效果。从弓形虫RH株总DNA中分别克隆棒状体蛋白ROP2和表面膜蛋白P30基因片段，联合克隆至表达载体pET28b中，构建重组质粒pET28b...
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：127 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
免疫鼠血清I所抗体亚类的测定..
‘奋产们沙.弓.，1，二I，二(1)(2)(3)图1.三组实验小鼠脾细胞CDS+亚群流式细胞检测图F19.1.Theresu]tofCDS+Tcellfromthreeexperimentalgroupbyfioweytometerass盯(1).P3O免疫鼠脾细胞CDS+的百分数(2).gp42免疫对照鼠脾细胞COS+的百分数(3).生理盐水对照鼠脾细胞CDS+的百分数(l).thenumberofeos+Teel一frommieeimmunizedwithP3o(2).thenumberofeos+Teellfrommieeimmunizedwithgp42(3).thenumberoreDs+TeellfrommieeimmunizedwithsalineBM.6饥日刁O洛%日.嘴1、102，奋，l砂.沙呀，夕1，1t)’，O刁1.1.!且...皿。‘巨(1)(2)(3)图2.二组实验小鼠脾细胞CD旷亚群流式细胞检测图Fig.ZTheresultofCD4十Teellfromthreeexperimentalgroupbyfioweyrometerassay
口二七上刀红，J、炭口匕P，‘八1几认习1pJU二几二，二乙共】t组别图1.实验鼠血清NO酶法测定结果(pmol/L)Fig.1.TheresultsofNOintheserafromexPerimentalmieedeteetedbyenZymeassay(pmol/L)3.讨论弓形虫病的治疗目前仍无理想的药物，人类尚无可用的疫苗来预防弓形虫感染，而畜牧上所使用的疫苗效果不尽如意〔60]。抗原疫苗所诱导的体液免疫不能完全抑制弓形虫感染，所以人们着手研制诱导细胞免疫的疫苗，其目的使通过转移免疫力和增强体内非特异性防御机制以达到治疗的目的。宿主抗弓形虫感染的获得性免疫应答，主要通过诱导T淋巴细胞和巨噬细胞产生具有多种生物活性的细胞因子(Cyt。kines
【参考文献】：
期刊论文
[1]弓形虫RH株ROP1抗原基因的克隆与表达[J]. 杨秋林,陆惠民,施宓,黄伟达. 中国人兽共患病杂志. 2001(05)
[2]弓形虫p35蛋白的基因克隆及其分子特征[J]. 张仁利,吴少庭,高世同,林敏,吕斌. 中国人兽共患病杂志. 2001(04)
[3]弓形虫RH株速殖子期表达型cDNA文库的构建及鉴定[J]. 杨秋林,陆惠民,邬敏辰,黄伟达. 寄生虫与医学昆虫学报. 2001(02)
[4]外源性一氧化氮对弓形虫速殖子凋亡的诱导作用[J]. 林京,胡建石,林建银. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2001(02)
[5]弓形体RH株抗原基因SAG1的扩增克隆及鉴定[J]. 周永安,陈观今,刘彦文,罗树红. 山西临床医药. 2001(04)
[6]弓形虫复合抗原基因SAG1/ROP1在大肠杆菌中表达的初步研究[J]. 陈海峰,陈观今,郭虹,郑焕钦,王又红. 中国人兽共患病杂志. 2001(02)
[7]弓形虫DNA疫苗免疫鼠体内重组质粒分布的探讨[J]. 占国清,吴少庭,李国光,高世同,林敏,郑春福. 中国人兽共患病杂志. 2000(06)
[8]弓形虫表面抗原P30基因分枝杆菌-大肠杆菌穿梭表达重组质粒的构建及序列测定[J]. 占国清,吴少庭,李国光,高世同,林敏,梁驹卿,郑春福. 中国人兽共患病杂志. 2000(05)
[9]弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定[J]. 高世同,吴少廷,林敏,梁驹卿,占国清. 中国人兽共患病杂志. 2000(02)
[10]紫外线减毒弓形虫ZS1株滋养体在小鼠体内的细胞免疫反应[J]. 吕芳丽,郑焕钦,郭虹,陈观今. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 1999(06)
本文编号：2906239
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：127 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
免疫鼠血清I所抗体亚类的测定..
‘奋产们沙.弓.，1，二I，二(1)(2)(3)图1.三组实验小鼠脾细胞CDS+亚群流式细胞检测图F19.1.Theresu]tofCDS+Tcellfromthreeexperimentalgroupbyfioweytometerass盯(1).P3O免疫鼠脾细胞CDS+的百分数(2).gp42免疫对照鼠脾细胞COS+的百分数(3).生理盐水对照鼠脾细胞CDS+的百分数(l).thenumberofeos+Teel一frommieeimmunizedwithP3o(2).thenumberofeos+Teellfrommieeimmunizedwithgp42(3).thenumberoreDs+TeellfrommieeimmunizedwithsalineBM.6饥日刁O洛%日.嘴1、102，奋，l砂.沙呀，夕1，1t)’，O刁1.1.!且...皿。‘巨(1)(2)(3)图2.二组实验小鼠脾细胞CD旷亚群流式细胞检测图Fig.ZTheresultofCD4十Teellfromthreeexperimentalgroupbyfioweyrometerassay
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【参考文献】：
期刊论文
[1]弓形虫RH株ROP1抗原基因的克隆与表达[J]. 杨秋林,陆惠民,施宓,黄伟达. 中国人兽共患病杂志. 2001(05)
[2]弓形虫p35蛋白的基因克隆及其分子特征[J]. 张仁利,吴少庭,高世同,林敏,吕斌. 中国人兽共患病杂志. 2001(04)
[3]弓形虫RH株速殖子期表达型cDNA文库的构建及鉴定[J]. 杨秋林,陆惠民,邬敏辰,黄伟达. 寄生虫与医学昆虫学报. 2001(02)
[4]外源性一氧化氮对弓形虫速殖子凋亡的诱导作用[J]. 林京,胡建石,林建银. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2001(02)
[5]弓形体RH株抗原基因SAG1的扩增克隆及鉴定[J]. 周永安,陈观今,刘彦文,罗树红. 山西临床医药. 2001(04)
[6]弓形虫复合抗原基因SAG1/ROP1在大肠杆菌中表达的初步研究[J]. 陈海峰,陈观今,郭虹,郑焕钦,王又红. 中国人兽共患病杂志. 2001(02)
[7]弓形虫DNA疫苗免疫鼠体内重组质粒分布的探讨[J]. 占国清,吴少庭,李国光,高世同,林敏,郑春福. 中国人兽共患病杂志. 2000(06)
[8]弓形虫表面抗原P30基因分枝杆菌-大肠杆菌穿梭表达重组质粒的构建及序列测定[J]. 占国清,吴少庭,李国光,高世同,林敏,梁驹卿,郑春福. 中国人兽共患病杂志. 2000(05)
[9]弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定[J]. 高世同,吴少廷,林敏,梁驹卿,占国清. 中国人兽共患病杂志. 2000(02)
[10]紫外线减毒弓形虫ZS1株滋养体在小鼠体内的细胞免疫反应[J]. 吕芳丽,郑焕钦,郭虹,陈观今. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 1999(06)
本文编号：2906239
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