鼠疟红内期动力素蛋白亚单位、核酸疫苗与细胞颗粒疫苗免疫效果的比较研究

发布时间：2021-01-25 02:13

　　疟疾仍然是一种严重危害人类健康的寄生虫病。据WHO最近统计，全世界有40％的人生活在疟区，每年有3亿人感染疟疾，1.2亿人发病，200万人病死，仅非洲每年就有80万儿童因疟疾病死。约占疟区儿童病死率的1／5。由于疟原虫抗药性和蚊媒对杀虫剂的耐受，使疟疾的治疗与控制更加困难。故疫苗的研制以及对疟疾保护性免疫机理的研究将可为控制疟疾提供有效的机会和手段。 自1973年Clyde以X-线照射疟原虫子孢子作为虫体疫苗研究以来，国内外还先后探索了各期虫体的粗制蛋白、提纯抗原蛋白，基因工程和人工合成肽亚单位（抗原表位）疫苗等各种疟疾疫苗。但它们各以其疫苗来源困难、分子短小、修饰性差、免疫保护性差、免疫原性弱等致命缺陷而难获成功，而且疫苗的设计、研究多限于B-细胞系统和B-细胞技术手段，即以疟疾的免疫血清或抗疟单抗筛选的虫体抗原表位为候选疟疾疫苗分子，其筛选的质与量受抗体的克隆数的限制。新近对核酸疫苗的研究尚未获得技术和效果上的突破。 如同其它真核细胞病原体疫苗尚未成功一样，看来疟疾疫苗的研究还有更深层的免疫机理及其相关的分子、细胞工艺过程需要了解、认识和探索。 从流行病学、临床观... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：116 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

重组质粒pGDyn酶切后的琼脂糖凝胶电泳分析

中国协和医科大学博士生论文图8PyDyn结构示意图dyn:mni为CTP酶活性结构域，dynamin_2为中部保守结构域，GED为GTP酶活性调控结构域根据上述结果结合Pfam软件(http://www.egr.ki.se/Pram/searel:.html)的预测(图，15)，Pfdny蛋白包含如下结构域:N端GTP酶活性结构域，中部保守结构域，非HP结构域(D3)，GTP酶活性调控结构域(GED)以及C端结构域(DS)，如图9示.MOdelSeq一Seq一HMM一HMM一SeorE-fromtofromtoevalUeA1ignmeDescriPtintOn

}l图16pyDynDI，D3，DS在大肠杆菌中获得表达(a)一6Hisveetorandveetorwithinsert:laneZ，3pETDIwithoutIPTGanwithoutIPTGandwithIPTG;lane6，7pETDSwithoutIPTGandwithIPT载体，蛋白Dl、D3和D5在大肠杆菌中的诱导表达产物分子量依次约为3k3d，一15pGEX一4卜l一GSTveetorandveetorwithinsert:Ianeg，10PGEXDIwit11，12pGEXD3withoutIPTGandwithIPTG:lane13，14pGEXDSwithoutIPTGaT一1一GST表达载体，蛋白D1、D3和D5在大肠杆菌中的诱导表达产物，分子量nes，15pGExT一4T一1一GsTveetorwithoutIPTGandwithIPTG.)“S，，为pGE大肠杆菌中的诱导表达，分子量约为29kd.;:1低分子量蛋白Makrer97，“，免疫的纯化和免疫血清的制备的变性蛋白产物经镍柱分离纯化(Invitrgone公司产品)，显示在pET一30(a)一6His载体中表达的纯化蛋白Dl、D3、n氏佐剂，按10一15ug蛋白/只，免疫小鼠，1月后再以不完，加强免疫2次，间隔3周。末次免疫后2周，尾静脉采血，1234567


本文编号：2998357