人睾丸组织新的泛素连接酶TRIM69/HSD34的鉴定及功能研究

发布时间：2021-03-18 11:34

　　已知精子发生过程中许多细胞特异性和发育阶段特异性蛋白质的合成和降解是依赖于泛素一蛋白酶体系统。本论文主要研究是从人睾丸组织发现一个新的E3泛素连接酶TRIM69,找到多个其泛素化修饰的蛋白,研究这些特异蛋白泛素化修饰后参与的细胞生理病理过程,间接了解TRIM69的功能,为下一步研究其在精子发生过程中的作用打好基础。TRIM69是我们室从人睾丸cDNA文库扩增得到的一个新基因,该基因编码蛋白为TRIM69,它含有保守的RING-Finger结构域,B-Box结构域,coiled-coil结构域,是TRIM/RBCC家族一名成员。文献提示TRIM家族很多成员都具有E3泛素连接酶活性,是含有RING结构域的E3泛素连接酶。本室前期工作,一定程度上,表明TRIM69具有E3泛素连接酶活性,我们进一步通过体外泛素化试验,证明TRIM69具有E3泛素连接酶活性。同时筛选到与TRIM69对应的E2泛素结合酶有UbcH2、UbcH6、UbcH5a、UbcH5c和UbcH13/Uev1a。RING结构域的发生点突变和缺失时,TRIM69体外E3泛素连接酶活性明显减弱,说明TRIM69的E3泛素连接酶的活... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
材料与方法
    实验材料
    实验方法
前言
结果
    一. TRIM69是一个新的E3泛素连接酶
        1. TRIM69结构域分析和功能提示
        2. TRIM69细胞内表达分布特点
        3. 体外泛素化实验
        4. 体内泛素化实验
    二. HUS1是TRIM69的一个底物
        1. 筛选有TRIM69表达的细胞
        2. TRIM69与HUS1相互作用
        3. TRIM69促HUS1泛素化修饰
        4. TRIM69对HUS1稳定性的影响
        5. DNA损伤情况下,TRIM69和HUS1水平的变化
    三. JAB1可能是TRIM69的又一个底物
        1. RAD1,TRIM69,HUS1和JAB1可形成复合物
        2. TRIM69与JAB1相互作用
        3 TRIM69和JAB1共同作用对HUS1水平的影响
        4. TRIM69对JAB1稳定性的影响
        5. TRIM69促JAB1泛素化修饰
        6. TRIM69对AP-1通路的作用
        7. TRIM69对细胞增殖影响
讨论
    一. TRIM69是一个新的E3泛素连接酶
    二. HUS1是TRIM69的一个底物
    三. JAB1可能是TRIM69的又一个底物
结论
参考文献
附录:英、汉名词对照
综述:JAB1的研究进展
    参考文献
在读期间论文与会议摘要写作情况
致谢



本文编号：3088246