虾青素对小鼠蛛网膜下腔出血早期脑损伤的保护机制的研究
发布时间：2021-03-20 20:59
目的研究虾青素对小鼠蛛网膜下腔出血（SAH）早期脑损伤的保护机制。方法 ICR雄性小鼠采用随机数字法随机分为四组:蛛网膜下腔出血组、假手术组、蛛网膜下腔出血+溶剂组（DMSO）、蛛网膜下腔出血+虾青素组。通过建立小鼠视交叉注血方法建立蛛网膜下腔出血模型,于手术后24 h记录神经功能评分,并应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法（TUNEL）、western blot法检测脑组织中的NOX2蛋白含量、ELISA法检测TNF-a/IL-1β水平,干湿法检测脑组织中含水量。结果与对照组相比,SAH后小鼠神经功能损伤评分加重,脑水肿加重,脑组织中的NOX2蛋白及脑组织中凋亡阳性细胞数也显著增多,TNF-a/IL-1β值明显升高;应用虾青素干预以后,小鼠神经功能改善,脑组织凋亡阳性细胞明显减少。同时,虾青素能够降低SAH后小鼠脑组织中NOX2蛋白,TNF-a/IL-1β水平值也明显降低。结论虾青素对s AH后早期脑损伤（EBI）具有保护作用,其作用机制可能与其抗氧化性有关。
【文章来源】：国际神经病学神经外科学杂志. 2019,46(04)
【文章页数】：5 页
)。2．2虾青素改善蛛网膜下腔出血后的脑水肿在正常状态下，脑组织中含水量在正常范围内，提示无明显脑水肿。而各组小鼠处理后24h，SAH组脑组织含水量较假手术组明显增加(P＜0．05)，溶剂组与SAH组之间无统计学差异，但虾青素给药组较SAH组脑组织含水量明显下降(P＜0．05)(图2)。sham1%hr24%hr--+-+Nox2β-actinATX2.52.01.51.00.50.0Relative%indensitysham1%hr24%hrATX--+-+****###(n=5，＊＊P＜0．01蛛血1h与24h未给药组对比假手术组;#P＜0．05、##P＜0．01蛛血1h与24h给药组对比各自时间点未给药组)图1ATX对小鼠SAH后NOX2表达的影响0.840.820.800.780.760.74Brain%Water%Content*ns#ShamSAHSAH+VehicleSAH+ATX(n=5，*P＜0．05蛛血组对比假手术组;#P＜0．05蛛血+虾青素组对比蛛血+溶剂组)图2AXT对小鼠SAH后脑含水量的影响2．3虾青素提高小鼠蛛网膜下腔出血后神经功能评分应用SAH后24小时的神经功能评分的改变来评估ATX对小鼠神经功能的保护。结果示小鼠处理后24h，SAH组小鼠活动评分较假手术组显著降低(P＜0．01)，溶剂组与SAH组之间无统计学差异，而虾青素给药组较SAH组的神经功能评分则明显提高(P＜0．05)(图3)。20151050Neurological%score*ns#ShamSAHSAH+VehicleSAH+ATX(n=5，*P＜0．01蛛血组对比假手术组;#P＜0．01蛛血+虾青素组对比蛛血+溶剂组)图3ATX对小鼠SAH后神经功能评分的影响·314·国
+ATX(n=5，*P＜0．01，蛛血组对比假手术组;#P＜0．01，蛛血+虾青素组对比蛛血+溶剂组)，A:ATX对小鼠SAH后TNF-α表达的影响;B:ATX对小鼠SAH后IL-1β表达的影响图42．5虾青素减少小鼠蛛网膜下腔出血后的细胞凋亡小鼠SAH后24h，TUNEL染色示SAH组阳性细胞较假手术组明显增加，溶剂组与SAH组差别不大，ATX给药组则凋亡细胞明显减少，提示ATX能减少蛛血后引起的神经元细胞大量凋亡(图5)。ShamSAHSAH+VehicleSAH+ATX图5ATX对小鼠SAH后神经细胞凋亡的影响3讨论本实验结果显示，蛛网膜下腔出血后NOX2表达明显增加，出血后小鼠的脑水肿加剧，神经功能缺失、炎症因子TNF/IL-1水平升高，同时半球的细胞凋亡细胞明显增多。而伤前30分钟腹腔注射虾青素后能够明显抑制机体的氧化应激、表现为NOX2蛋白表达量明显下降，同时改善机体的脑水肿和神经功能，结果提示NOX2是伤后氧化应激的主要调节因素，虾青素能够抑制氧化应激来发挥神经保护作用。动脉瘤性蛛网膜下腔出血是一个严重的脑血管疾病，其死亡率高达50%，同时在幸存者中约30%患者遗有不同程度的残疾。大量的研究表明，氧化应激在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中起着极其重要的作用，蛛网膜下腔出血后的自由基来源于线粒体的呼吸障碍及外源性的血红蛋白，还存在自由基产生酶的上调，例如诱导型一氧化氮合酶(iNOS)，黄嘌呤氧化酶，NADPH氧化酶(NOX)，以及参与花生四烯酸代谢的酶等。越来越多的证据表明NADPH氧化酶(NOX)是中枢神经系统活性氧簇(ＲOS)的主要来源［13，14］。有实验证
【参考文献】：
期刊论文
[1]内皮型一氧化氮合酶与蛛网膜下腔出血的研究进展[J]. 李雪莹,赵迎春,陈晟. 国际神经病学神经外科学杂志. 2018(04)
[2]Nrf2基因敲除对小鼠蛛网膜下腔出血后脑损伤的作用[J]. 李桃,王汉东,丁宇,何进,丁可,陆新宇,徐建国. 医学研究生学报. 2014(11)
[3]小鼠蛛网膜下腔出血模型中出血量评分与神经功能评分的量化关系分析[J]. 陈凡帆,全伟,吕建平. 中华神经医学杂志. 2012 (01)
本文编号：3091661
【文章来源】：国际神经病学神经外科学杂志. 2019,46(04)
【文章页数】：5 页
)。2．2虾青素改善蛛网膜下腔出血后的脑水肿在正常状态下，脑组织中含水量在正常范围内，提示无明显脑水肿。而各组小鼠处理后24h，SAH组脑组织含水量较假手术组明显增加(P＜0．05)，溶剂组与SAH组之间无统计学差异，但虾青素给药组较SAH组脑组织含水量明显下降(P＜0．05)(图2)。sham1%hr24%hr--+-+Nox2β-actinATX2.52.01.51.00.50.0Relative%indensitysham1%hr24%hrATX--+-+****###(n=5，＊＊P＜0．01蛛血1h与24h未给药组对比假手术组;#P＜0．05、##P＜0．01蛛血1h与24h给药组对比各自时间点未给药组)图1ATX对小鼠SAH后NOX2表达的影响0.840.820.800.780.760.74Brain%Water%Content*ns#ShamSAHSAH+VehicleSAH+ATX(n=5，*P＜0．05蛛血组对比假手术组;#P＜0．05蛛血+虾青素组对比蛛血+溶剂组)图2AXT对小鼠SAH后脑含水量的影响2．3虾青素提高小鼠蛛网膜下腔出血后神经功能评分应用SAH后24小时的神经功能评分的改变来评估ATX对小鼠神经功能的保护。结果示小鼠处理后24h，SAH组小鼠活动评分较假手术组显著降低(P＜0．01)，溶剂组与SAH组之间无统计学差异，而虾青素给药组较SAH组的神经功能评分则明显提高(P＜0．05)(图3)。20151050Neurological%score*ns#ShamSAHSAH+VehicleSAH+ATX(n=5，*P＜0．01蛛血组对比假手术组;#P＜0．01蛛血+虾青素组对比蛛血+溶剂组)图3ATX对小鼠SAH后神经功能评分的影响·314·国
+ATX(n=5，*P＜0．01，蛛血组对比假手术组;#P＜0．01，蛛血+虾青素组对比蛛血+溶剂组)，A:ATX对小鼠SAH后TNF-α表达的影响;B:ATX对小鼠SAH后IL-1β表达的影响图42．5虾青素减少小鼠蛛网膜下腔出血后的细胞凋亡小鼠SAH后24h，TUNEL染色示SAH组阳性细胞较假手术组明显增加，溶剂组与SAH组差别不大，ATX给药组则凋亡细胞明显减少，提示ATX能减少蛛血后引起的神经元细胞大量凋亡(图5)。ShamSAHSAH+VehicleSAH+ATX图5ATX对小鼠SAH后神经细胞凋亡的影响3讨论本实验结果显示，蛛网膜下腔出血后NOX2表达明显增加，出血后小鼠的脑水肿加剧，神经功能缺失、炎症因子TNF/IL-1水平升高，同时半球的细胞凋亡细胞明显增多。而伤前30分钟腹腔注射虾青素后能够明显抑制机体的氧化应激、表现为NOX2蛋白表达量明显下降，同时改善机体的脑水肿和神经功能，结果提示NOX2是伤后氧化应激的主要调节因素，虾青素能够抑制氧化应激来发挥神经保护作用。动脉瘤性蛛网膜下腔出血是一个严重的脑血管疾病，其死亡率高达50%，同时在幸存者中约30%患者遗有不同程度的残疾。大量的研究表明，氧化应激在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中起着极其重要的作用，蛛网膜下腔出血后的自由基来源于线粒体的呼吸障碍及外源性的血红蛋白，还存在自由基产生酶的上调，例如诱导型一氧化氮合酶(iNOS)，黄嘌呤氧化酶，NADPH氧化酶(NOX)，以及参与花生四烯酸代谢的酶等。越来越多的证据表明NADPH氧化酶(NOX)是中枢神经系统活性氧簇(ＲOS)的主要来源［13，14］。有实验证
【参考文献】：
期刊论文
[1]内皮型一氧化氮合酶与蛛网膜下腔出血的研究进展[J]. 李雪莹,赵迎春,陈晟. 国际神经病学神经外科学杂志. 2018(04)
[2]Nrf2基因敲除对小鼠蛛网膜下腔出血后脑损伤的作用[J]. 李桃,王汉东,丁宇,何进,丁可,陆新宇,徐建国. 医学研究生学报. 2014(11)
[3]小鼠蛛网膜下腔出血模型中出血量评分与神经功能评分的量化关系分析[J]. 陈凡帆,全伟,吕建平. 中华神经医学杂志. 2012 (01)
本文编号：3091661
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