一种合并高血脂和诱导型高血压的新型小鼠模型的构建与鉴定

发布时间：2023-02-26 12:22

　　目的构建一种合并高血脂和诱导型高血压的小鼠模型。方法利用CRISPR/Cas9技术,采用同源重组的方式,将一段由TetOn操控并以高斯荧光素酶作为报告基因的血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)过表达序列替换内源性载脂蛋白E(ApoE)的编码区,从而抑制ApoE基因表达,获得转基因小鼠ApoE^A/A。通过荧光定量PCR检测小鼠ApoE基因的表达情况;通过饮用水添加强力霉素(doxycycline,Dox),诱导小鼠体内产生Ang Ⅱ;并通过监测小鼠血液中高斯荧光素酶活性指示小鼠体内Ang Ⅱ表达情况,同时采用无创鼠尾尾套法监测小鼠血压;利用全自动生化分析仪测定小鼠血浆中血脂的含量。结果 ApoE^A/A小鼠中ApoE基因为全身缺陷;强力霉素能诱导ApoE^A/A小鼠体内持续产生Ang Ⅱ,继而引发小鼠发生高血压;给予强力霉素处理并不影响ApoE^A/A小鼠血脂含量。结论成功构建了一种高脂血症和诱导型高血压的小鼠模型,可应用于高血压、高血脂,特别是合并双因素的相关疾病机制与干预效果的研究。

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【文章目录】：
1 材料及方法
    1.1 主要试剂和仪器
    1.2 实验动物
    1.3 小鼠基因型鉴定
    1.4 qRT-PCR检测Apo E基因的转录水平
    1.5 高斯荧光素酶活性检测
    1.6 小鼠高血压造模
    1.7 小鼠血压检测
    1.8 血脂检测
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 转基因小鼠的构建
    2.2 Apo EA/A小鼠基因型鉴定
    2.3 Apo E基因m RNA表达鉴定
    2.4 高斯荧光素酶及血压的检测
    2.5 血脂的检测
3 讨论



本文编号：3750400