颗粒蛋白前体促进去卵巢小鼠的骨质疏松

发布时间：2023-08-05 19:50

　　目的探讨颗粒蛋白前体(PGRN)对去卵巢小鼠骨质疏松的影响。方法建立野生型和PGRN敲除(PGRN^-/-)小鼠卵巢切除骨质疏松模型,采用微型计算机断层扫描(Micro-CT)和三维重建获得小鼠骨组织微观结构并进行骨小梁数据分析, HE染色观察骨组织形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察骨组织中破骨细胞数量,免疫组织化学染色法检测骨组织核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 P65表达,荧光定量PCR检测骨组织TRAP mRNA水平, Western blot法检测骨组织基质金属蛋白酶9(MMP9)、 MMP14、 P65蛋白水平。结果与野生型小鼠相比, PGRN^-/-组小鼠骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)及骨小梁厚度(Tb.Th)均显著增加,骨小梁空间距(Tb.S)显著降低;在PGRN^-/-小鼠中观察到骨质疏松程度更轻,破骨细胞数量更少,骨组织RANKL、 TNF-α、 P65蛋白, TRAP mRNA, MMP9、 MMP14表达均低于野生型小鼠...

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠卵巢切除骨质疏松模型的建立
        1.2.2 微型计算机断层扫描(Micro-CT)检查小鼠腰椎骨质疏松情况
        1.2.3 HE染色检测小鼠腰椎骨组织形态
        1.2.4 TRAP染色检测小鼠股骨组织破骨细胞数量
        1.2.5 免疫组织化学染色法检测小鼠股骨组织RANKL、 TNF-α、 P65的表达
        1.2.6 反转录PCR检测股骨组织TRAP mRNA水平
        1.2.7 Western blot法检测MMP9、 MMP14、 P65蛋白水平
        1.2.8 统计学分析
2 结果
    2.1 PGRN-/-小鼠腰椎BMD、 BV/TV、 Tb.N、 Tb.Th显著增高, Tb.S显著降低
    2.2 PGRN-/-小鼠腰椎组织骨小梁结构较好
    2.3 PGRN-/-组小鼠骨组织破骨细胞数量减少
    2.4 PGRN-/-组小鼠股骨组织RANKL、 TNF-α、 P65表达减少
    2.5 PGRN-/-组小鼠股骨组织TRAP mRNA、 MMP9、 MMP14、 P65蛋白水平降低



本文编号：3839236