Nac-1在神经干/祖细胞自我更新维持中的作用

发布时间：2023-10-31 19:33

　　目的研究Nac-1在神经干/祖细胞(NSPCs)自我更新维持中的作用及其机制。方法以胚胎干细胞(ESCs)来源的NSPCs为细胞模型,利用RNA干扰法敲低Nac-1表达并通过定量RT-PCR和Western blot检测干扰效率;通过细胞计数和流式细胞技术,检测NSPCs的增殖和凋亡情况;并利用荧光素酶等实验检测Nac-1对c-Myc的转录调控作用。结果 Nac-1在NSPCs中高表达,分化后其mRNA水平下降了77%。与对照组相比,实验组(干扰组)NSPCs中Nac-1的mRNA水平显著下降,干扰效率分别是69%和66%。Nac-1敲低组的NSPCs增殖缓慢,凋亡增多,趋向于分化,c-Myc的mRNA水平降低46%和57%。荧光素酶分析显示,Nac-1敲低组中,c-Myc启动子的活性下降了24%和36%,提示Nac-1可以调节c-Myc基因的启动子活性。结论Nac-1促进NSPCs增殖并抑制其分化,是NSPCs自我更新维持所必需;Nac-1促自我更新的作用可能通过调控c-Myc的转录而实现。

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 质粒构建
    1.3 细胞培养及转染
    1.4 定量RT-PCR和Western blot检测
    1.5 细胞增殖曲线
    1.6 流式细胞仪检测细胞凋亡
    1.7荧光素酶分析
    1.8 统计学处理
2 结果
    2.1 Nac-1在NSPCs中高表达并随着NSPCs的分化而下降
    2.2 Nac-1的敲低效果观察及其对NSPCs增殖的影响
    2.3 Nac-1敲低对NSPCs分化潜能的影响
    2.4 Nac-1对c-Myc的转录调控作用
3 讨论



本文编号：3859350