核仁素在血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞表型转化中的作用

发布时间：2023-11-10 18:55

　　目的:探讨核仁素在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化中的作用。方法:以AngⅡ诱导大鼠VSMCs表型转化为模型,观察AngⅡ对VSMCs表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、钙调理蛋白(calponin)、平滑肌蛋白22α(SM22α)和骨桥蛋白(OPN)mRNA和蛋白表达的影响,并观察VSMCs表型转化时核仁素mRNA和蛋白的时空表达模式;进一步采用核仁素基因转染及RNA干扰技术观察核仁素对上述VSMCs表型转化标志物mRNA和蛋白表达的影响。结果:不同浓度的AngⅡ刺激VSMCs不同时间后,VSMCs收缩表型标志物α-SMA、calponin和SM22α的mRNA和蛋白表达逐渐减少,而合成表型标志物OPN的mRNA和蛋白表达逐渐增加(P<0.05);不同浓度AngⅡ刺激VSMCs不同时间后,随着时间和剂量增加,核仁素的mRNA和蛋白表达在一定程度上逐渐升高;AngⅡ可诱导核仁素从细胞核向细胞浆移位;核仁素过表达可促进Ang II诱导的VSMCs表型转化,核仁素表达下调后,其促进表型转化作用被解除。结论:核仁素具有促进Ang II诱导的...

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【文章目录】：
材 料 和 方 法
    1 细胞培养
    2 主要试剂
    3 方法
        3.1 细胞核蛋白、胞浆蛋白的分离以及细胞总蛋白的提取
        3.2 细胞总RNA的提取,逆转录和RT-qPCR分析
        3.3 间接细胞免疫荧光检测核仁素的定位
        3.4 Western blot实验
        3.5 pcDNA3.1-Nuc/siRNA-Nuc重组质粒的扩增和提取
        3.6 细胞的瞬时转染
    4 统计学处理
结 果
    1 AngⅡ对VSMCs表型转化的影响
    2 AngⅡ对血管平滑肌细胞中核仁素表达的影响
    3 核仁素过表达对Ang II诱导的VSMCs表型转化的影响
    4 敲减核仁素表达对Ang II诱导的VSMCs表型转化的影响
讨 论



本文编号：3862125