重组人血管内皮细胞因子VEGF183刺激HUVEC体外增殖

发布时间：2023-11-25 01:03

　　VEGF183为VEGF-A基因一个拼接异构体,因其蛋白序列与VEGF189高度同源,导致其功能研究被忽视,所以目前VEGF183功能仍需进一步研究。本研究通过毕赤酵母表达并用琼脂糖肝素亲和层析方法获得重组人VEGF183蛋白,MTT法研究VEGF183蛋白在体外对HUVEC增殖刺激能力,并分别与VEGF165、VEGF189的相应活性作对比。Transwell与划痕实验分别研究其对HUVEC的迁移能力,Miles assay研究其对大鼠血管通透能力,并与VEGF189的相应活性作对比。结果发现,VEGF183仍保留对HUVEC增殖和迁移的刺激能力,但弱于VEGF165,强于VEGF189。此外,VEGF183拥有强于VEGF189的刺激血管通透能力。本研究结果提示VEGF183可能为实现血管生成过程中精确调控的一个异构体。

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【文章目录】：
1 结果与分析
    1.1 纯化蛋白VEGF183的SDS-PAGE和Western blotting鉴定
    1.2 VEGF183蛋白可增加血管的通透性
    1.3 VEGF183纯化蛋白及VEGF165、VEGF189促进血管内皮细胞增殖作用
    1.4 Transwell实验
2 讨论
3 材料与方法
    3.1 实验材料
    3.2 pPIC9K-VEGF183重组质粒的构建
    3.3 pPIC9K-VEGF183高拷贝酵母表达克隆的筛选
    3.4 VEGF183蛋白的表达与纯化
    3.5 血管通透性实验
    3.6 MTT实验
    3.7 Transwell实验



本文编号：3866960