Wnt信号通路中AXIN1上调蛋白AXUD1的克隆表达及其功能 研究

发布时间：2024-03-09 17:15

　　Axud1(Axin1 up-regulated)基因是近年来在人类结肠癌细胞中鉴定出的受Wnt信号通路中的轴蛋白AXIN1上调表达的基因。该基因含有五个外显子，其编码产物为分子量63kD的细胞核内蛋白，该基因在肺癌、肾癌、肝癌和结肠癌中的表达较相应的正常组织均明显降低。通过GENK BANK上BLAST的搜索结果表明，AXUD1与TGF-β诱导的凋亡蛋白2、12(TAIP-2、TAIP-12有较高的同源性，提示axud1可能是一个具有肿瘤抑制功能的基因，并可能在TGF-β诱导的细胞凋亡中起着重要作用。 为了进一步研究AXUD1在人类肿瘤发生中的作用及axud1基因的表达状况与TGF-β介导的信号通路的关系，本实验研究分为三个部分：(1)axud1基因cDNA全长编码区的克隆和HA表位标记的axud1基因表达载体的构建；(2)探讨肝癌细胞HepG2和肺腺癌SPC-A1细胞中TGF-β1诱导的axud1基因表达的时间、剂量效应以及诱导表达的可能机理，并研究AXUD1的过表达对细胞周期和细胞凋亡相关蛋白表达的影响；(3)axud1原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达。 ...

【文章页数】：78 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1Wnt信号转导通路

月IJ舀糖蛋白介导的Wnt信号通路在许多细胞过程，如细胞迁移、形态发生及肿瘤的发生等过程中起着极为重要的类，Wnt作用于细胞表面受体Fri22led，继而激lled家族蛋白(Dsh)，包括Dvl一1，Dvl一2，和Dvl一3合成酶激酶3p(GSK一3p)的效应，从而稳定p一cat....

图2Smad介导的TGF一p信号转导通路

第一军医大学博士学位论文mad，R一Smad)，包括Smadl、SmadZ、Smad3、SmMad，这一类Smad在特定的TGF一p超家族成员介挥作用，如:BMPZ/4通过Smadl和Smads，TGF一和Smad3;(2)通用Smad(CommonSmad，C一Sm的Medea....

图1一4A:重组质粒pGEM一T/axudl用SP6引物测序结果

—452bPZsobp一图1一ZB:重组质粒pGEM一T/axudl(S)和pGEM一1’/axudl(AS)的酶切鉴定l矛19.1一ZB:工dentifieationofRestrietionmaPofreeombinantplasmidspGEM一T/axudl(S)andp....

图2一4;FCM测定HepGZ/peDNA3.1和HepGZ/ha一axudl两组细胞中DNA

二公……健健健渊渊渊姗姗姗姗姗(B)HepGZ/ha一axudl图2一4;的含量FCM测定HepGZ/peDNA3.1和HepGZ/ha一axudl两组细胞中DNAFigZ一4:DNACOfltefltanaylsisforHepGZ/peDNA3.1andHepGZ/ha一ax....

本文编号：3923674