黄绿青霉素对血管内皮细胞增殖和凋亡作用研究

发布时间：2017-05-30 22:03

  本文关键词：黄绿青霉素对血管内皮细胞增殖和凋亡作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的 通过体外培养人脐静脉血管内皮细胞CIT中毒模型，观察CIT对血管内皮细胞增殖、凋亡的影响和作用机制。 方法 1.体外培养人脐静脉血管内皮细胞，用CIT毒素进行染毒处理。 2.通过酶标仪(MTT)检测不同浓度CIT，不同作用时间对内皮细胞活性的影响。 3.通过流式细胞术（FCM）检测不同浓度CIT，，不同作用时间对内皮细胞凋亡及细胞周期的影响。 4.通过蛋白免疫印迹方法（Westernblotting）检测内皮细胞凋亡调节蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9，PARP的表达水平。 结果 1.CIT降低人脐静脉血管内皮细胞的活性，浓度越高/作用时间越长细胞活性越减弱(P0.05)。黄绿青霉素通过阻止人脐经脉血管内皮细胞中DNA的分裂使细胞滞留在G0/G1期，并使S期延长(P0.05)。 2．CIT在10μg/L，20μg/L的作用浓度均可引发细胞凋亡，高浓度CIT组凋亡更明显(P0.05)。 3.CIT染毒HUVECs的促凋亡蛋白Bax表达量增高，抑凋亡蛋白Bcl-2表达量降低，高剂量组变化更加明显（P0.05）。 4.CIT染毒组caspase-3和caspase-9的活化片段明显增高，PARP降解产物的含量也呈增高状态，且高剂量染毒组更加明显。 结论 1.CIT通过阻止人脐经脉血管内皮细胞中DNA的分裂使细胞滞留在G0/G1期，阻止细胞分裂增殖，从而降低血管内皮细胞的活性，且随CIT浓度的升高，滞留作用越明显。 2. CIT可导致血管内皮细胞凋亡，并呈剂量-效应关系，由此引起的血管内皮损伤，或可在动脉粥样硬化、冠心病等发生中起到一定作用。 3.CIT能够改变Bax/Bcl-2的比例形成同源二聚体，启动线粒体凋亡，上调活化的caspase-9含量，从而形成级联反应进一步活化caspase-3，并识别其底物PARP并使之降解从而阻止了PARP对损伤DNA的修复功能，最后导致细胞凋亡，而由此引起的血管内皮受损，可能成为引发动脉粥样硬化、冠心病的使动因素。
【关键词】：黄绿青霉素 血管内皮细胞 Bax Bcl-2 Caspase-3 Caspase-9 PARP
【学位授予单位】：泰山医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 符号说明8-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-34
• 结果34-40
• 讨论40-46
• 结论46-47
• 展望47-48
• 参考文献48-53
• 综述一53-57
• 参考文献55-57
• 综述二57-63
• 参考文献60-63
• 致谢63-64
• 攻读学位期间发表的学术论文64

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张晓晖,姚天明,黄高f,王文亮;细胞凋亡的最新研究进展[J];第四军医大学学报;2002年S1期

2 李群伟;侯海峰;李亚鲁;韩纪举;王欣农;李晓梅;;脱氧雪腐镰刀菌烯醇致家兔多脏器损伤的实验观察[J];中国地方病防治杂志;2007年01期

3 李德权;吕宏彦;段利彬;郭一;陈忠;陆为武;;2008年吉林省国家级克山病病情监测报告[J];中国地方病防治杂志;2009年03期

4 彭洪涛;刘淑萍;;bcl-2基因与细胞凋亡关系的研究进展[J];内蒙古医学杂志;2006年04期

5 姚峰,陈倩,陶琳,黎辉,刘铭球;Caspase-3基因在肺癌中的表达及其与bcl-2和Bax蛋白表达的关系[J];肿瘤防治杂志;2004年01期

6 朱国萍,程阳,廖军,徐冲;细胞凋亡中的Caspase家族[J];生物化学与生物物理进展;2000年02期

7 陈同生;王小平;孙磊;王会营;王龙祥;;Caspase-3参与调控蟾酥诱导人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞的凋亡[J];生物化学与生物物理进展;2008年01期

8 付永锋,樊廷俊;Bcl-2家族蛋白与细胞凋亡[J];生物化学与生物物理学报;2002年04期

9 李超;伏圣博;刘华玲;马欣荣;;细胞凋亡研究进展[J];世界科技研究与发展;2007年03期

10 李红伟,王守彪;脑缺血后细胞凋亡与PARP的关系[J];泰山医学院学报;2004年02期

  本文关键词：黄绿青霉素对血管内皮细胞增殖和凋亡作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：407998