抗噬菌体甲型副伤寒沙门菌突变菌的构建及其生物学特性

发布时间：2017-06-03 11:14

  本文关键词：抗噬菌体甲型副伤寒沙门菌突变菌的构建及其生物学特性，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:采用同源重组基因敲除方法构建3株甲型副伤寒沙门菌(副甲)抗噬菌体突变菌,并研究其生物学特性。方法:通过PCR和融合PCR方法获得了2、3、5号同源臂片段,经酶切后与pYG4载体连接,构建pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重组质粒。经PCR测序鉴定正确后,与野生型副甲菌进行同源重组,获得2、3、5号3株抗噬菌体突变菌。将3株突变菌和野生型副甲菌经不同种类和浓度的抗生素、不同pH值和温度及不同浓度的盐离子处理后,测量菌株的A595值,分析3株突变菌对抗生素、温度、pH值和盐离子的敏感性以及生长曲线。结果:PCR和融合PCR扩增出3个同源臂,构建的pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重组质粒经PCR测序表明构建成功;同源重组和抗噬菌体验证表明成功获得3株抗噬菌体突变菌。3株突变菌产生了卡那霉素抗性,且对链霉素表现出敏感性;2号菌表现出氨苄青霉素抗性,5号菌表现高温度耐受性;与野性型副甲菌比较,3株突变菌的生长曲线明显平缓,尤以2号突变菌最为突出。结论:成功构建抗噬菌体突变菌,并获得一些特殊的生物学特性。
【作者单位】： 昆明理工大学医学院病原微生物学实验室;昆明学院医学院临床检验教研室;成都军区昆明总医院核医学科;湖北省孝感市中心医院泌尿外科;
【关键词】： 甲型副伤寒沙门菌 突变菌 同源重组 生物学特性 噬菌体抗性
【基金】：国家自然科学基金资助课题(31160193) 云南省教育厅科研项目资助课题(2010Y398) 云南省科技厅应用基础研究面上项目资助课题(2010ZC055;2012FB135)
【分类号】：R378
【正文快照】： 甲型副伤寒沙门菌(副甲菌)以粪口途径传播,是甲型副伤寒的病原菌。人群对副甲菌普遍易感,尤以儿童和青壮年发病率最高。每年全球伤寒患者约2 200万例,其中由副甲菌引起的约500万例[1]。噬菌体是生物圈中最多的微生物,其数量约是细菌的10倍[2],作为细菌的杀手,噬菌体对微生物生

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 王景;穆媛媛;黎庶;陈志瑾;熊坤;丛延广;;革兰阴性菌基因敲除载体的构建及其应用[J];第三军医大学学报;2009年23期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 姜碧霞;李俊明;;结核分枝杆菌双组分调节系统Dos的研究进展[J];广东医学;2012年11期

2 熊坤;陈志瑾;李建华;朱春岳;丛延广;饶贤才;;甲型副伤寒沙门菌减毒株的构建与鉴定[J];免疫学杂志;2015年01期

3 胡勇;丛延广;邱荣蓉;张云茹;林治华;;伤寒沙门菌bcfD基因敲除突变株的构建[J];生物技术;2011年03期

4 包红朵;张辉;李国峰;周艳;王冉;;多种噬菌体单独及混合使用的喷雾灭菌研究[J];食品科学;2013年19期

5 秦旭颖;陈岩;林书祥;杨洪江;;铜绿假单胞菌噬菌体K5中DNA聚合酶等基因在宿主中的表达[J];中国生物化学与分子生物学报;2014年05期

6 郭敏利;朴永哲;王世全;黄玮;周华成;杨洪泽;唐丽娜;;丙酸杆菌基因敲除体系的构建及其应用[J];中国微生态学杂志;2013年07期

7 王晴;张r文;陈绵绵;张炜;;1株禽致病性大肠杆菌T4噬菌体的分离及其尾丝蛋白的比较分析[J];畜牧与兽医;2013年12期

8 Filipa F Vale;Mónica Oleastro;;Overview of the phytomedicine approaches against Helicobacter pylori[J];World Journal of Gastroenterology;2014年19期

9 Babak Bakhshinejad;Majid Sadeghizadeh;;Bacteriophages and their applications in the diagnosis and treatment of hepatitis B virus infection[J];World Journal of Gastroenterology;2014年33期

10 靳静;陈松建;张改;王书伟;李振江;李亚辉;王进;王中全;;克雷伯菌属噬菌体LH-01的生物学特性及其对败血症小鼠疗效的初步研究[J];中国病原生物学杂志;2015年01期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 吴彬;侯占铭;;基因敲除技术及其应用[A];北方遗传资源的保护与利用研讨会论文汇编[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 TAJ MUHAMMAD KAMRAN（太极）;[D];昆明理工大学;2014年

2 乐率;铜绿假单胞菌噬菌体PaP1与宿主相互作用的研究[D];第三军医大学;2014年

3 徐嘉良;O1群El Tor型霍乱弧菌分型噬菌体VP4感染受体的研究[D];中国疾病预防控制中心;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前7条

1 李宝利;肠炎沙门菌C50041 crp、spiC基因缺失株的构建及其免疫生物学特性研究[D];扬州大学;2013年

2 沈婵娟;嗜水气单胞菌噬菌体的生物学特性及基因组学研究[D];南京农业大学;2013年

3 徐花;粘质沙雷菌噬菌体的分离鉴定及噬菌体疗法对粘质沙雷菌感染小鼠的疗效观察[D];吉林大学;2014年

4 滑玉会;大肠杆菌噬菌体IME-EC1耐受菌的筛选及耐受机制研究[D];安徽医科大学;2014年

5 宋磊;分枝杆菌噬菌体L5 LysA、LysB的表达及活性研究[D];吉林农业大学;2014年

6 李莎莎;利用Ion Torren测序平台和生物信息学分析几株细菌和病毒基因组[D];中国人民解放军军事医学科学院;2014年

7 姜碧霞;靶向自噬促进/结核分枝杆菌持留期抗原双相治疗性DNA疫苗构建[D];南昌大学;2012年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 丛延广,徐启旺;利用Mini-Tn5转座子诱导弗氏枸橼酸杆菌插入突变的研究[J];第三军医大学学报;2004年13期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵勇,韩文瑜;噬菌体治疗研究进展[J];畜牧兽医科技信息;2002年04期

2 刘北一,富宁;噬菌体突变库技术在蛋白质改造中的应用[J];免疫学杂志;2004年S1期

3 毛普加;洪愉;毛小萍;井申荣;曾韦锟;;噬菌体受体及其鉴定方法[J];中国微生态学杂志;2014年06期

4 熊鸿燕;;一种新型的微生物控制技术—噬菌体溶菌技术[J];中国消毒学杂志;2006年04期

5 尚兰琴,郝卫东,曹晓丽,王钊;太阳光及紫外线照射诱发M13mp2噬菌体DNA产生8-OHdG的作用[J];环境与职业医学;2002年05期

6 钱震雯;岳启安;田凤丽;;噬菌体治疗的研究概况[J];医学综述;2007年16期

7 代小英;许欣;;噬菌体对消毒剂抵抗力的研究进展[J];中国消毒学杂志;2006年06期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 张克斌;铜绿假单胞菌噬菌体的分离鉴定及其基因组学研究[D];第三军医大学;2001年

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 杜崇涛;大肠杆菌O157噬菌体的分离鉴定及其初步应用[D];吉林大学;2008年

2 陈海阳;大肠杆菌噬菌体的分离纯化及其在海水养殖中的应用[D];厦门大学;2013年

  本文关键词：抗噬菌体甲型副伤寒沙门菌突变菌的构建及其生物学特性，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：418004