副溶血性弧菌Vop T蛋白的表达及其抗体的毒力菌株特异性研究
发布时间：2017-06-06 06:04
本文关键词：副溶血性弧菌Vop T蛋白的表达及其抗体的毒力菌株特异性研究，，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：目的研究副溶血性弧菌VopT蛋白的菌群特异性,为建立致病性副溶血性弧菌的快速检测方法以及探讨VopT的作用机制奠定基础。方法根据副溶血性弧菌VopT蛋白基因(VPA1327)序列设计合成引物,通过PCR从副溶血性弧菌致病株WX06152(血清型O3∶K6)中扩增出目的基因,构建原核表达载体pET-30a(+)-VPA1327并转化大肠杆菌BL21(DE3)。经IPTG诱导表达,重组蛋白应用MALDI-TOF-MS/MS鉴定和His镍柱纯化,并通过免疫BALB/c小鼠制备抗血清,建立副溶血性弧菌VopT蛋白的间接ELISA检测方法,并分析其敏感性和毒力菌株特异性。结果成功表达了大小为33kDa融合蛋白,肽指纹图谱与副溶血性弧菌VopT蛋白一致。重组VopT抗血清能够特异性检测副溶血性弧菌毒力株的全菌细胞及其裂解蛋白,与环境株及其它种属菌株无明显交叉反应,灵敏度达到105 CFU·mL-1。结论重组VopT的抗血清具有良好特异性,为探讨VopT致病机理和分泌机制研究提供了一定的参考依据。
【作者单位】： 扬州大学食品科学与工程学院;扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室;江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心;
【关键词】： 副溶血性弧菌 VopT蛋白 原核表达 多克隆抗体 特异性
【基金】：江苏省科技支撑计划项目(No.BE2013733) 苏北科技发展计划项目(No.BC2013438)联合资助~~
【分类号】：R378
【正文快照】： 江苏省科技支撑计划项目(No.BE2013733)、苏北科技发展计划项目(No.BC2013438)联合资助副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)广泛分布于海水环境和海产品中,流行病学研究显示Vp引起的食源性疾病呈世界性分布,目前已经成为沿海国家和地区面临的重要公共卫生问题之一[1]。研究
【共引文献】
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1 张庆宁;胡明;朱荣生;任相全;武英;王怀忠;刘玉庆;王述柏;;生态养猪模式中发酵床优势细菌的微生物学性质及其应用研究[J];山东农业科学;2009年04期
2 赵新亮;马强;;玉米SRAP反应体系的建立与优化[J];安徽农业科学;2006年15期
3 刘素霞;洪达;高武军;邓传良;卢龙斗;;石榴RAPD反应体系优化及亲缘关系研究[J];安徽农业科学;2007年36期
4 张金洲;项智锋;王清华;李学斌;赵海涛;张廷虎;郭玉娇;;利用RAPD标签分析3种鲤科鱼群体的遗传变异[J];安徽农业科学;2008年23期
5 张金洲;项智锋;李学斌;王清华;张廷虎;赵海涛;郭玉娇;;利用RAPD指纹分析技术分析3种鲤科鱼群体的遗传变异[J];安徽农业科学;2008年24期
6 张小华;马爱军;陆建兰;;江西红壤α-淀粉酶分离株的多态性研究[J];安徽农业科学;2008年35期
7 徐冉;汤雪燕;缪e
本文编号：425519
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