姜黄素对阿尔茨海默病模型大鼠海马神经元自噬的影响

发布时间：2017-09-05 16:40

  本文关键词：姜黄素对阿尔茨海默病模型大鼠海马神经元自噬的影响

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【摘要】：目的：观察姜黄素(Curcumin)和雷帕霉素(Rapamycin)对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力、海马区Ap表达及神经元自噬的影响,探讨姜黄素在阿尔茨海默病中的神经保护作用及可能的机制。 方法：健康7周龄雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠80只,随机分成四组：对照组、AD模型组、姜黄素组和雷帕霉素组,对后三组大鼠双侧海马CA1区注射Ap1-42,构建AD大鼠模型；对照组则予以等体积生理盐水注射。药物干预在造模前5天即开始,对照组和AD模型组予以生理盐水腹腔注射,姜黄素组和雷帕霉素组则分别予以姜黄素(300mg/kg/d)和雷帕霉素(1mg/kg/d)腹腔注射；直至术后第21天处死全部大鼠。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力；HE染色观察海马神经元形态；免疫组化法观察海马内Aβ1-40表达；电镜观察CA1区神经元内自噬体；Western Blot测定海马内自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达。 结果：1.Morris水迷宫结果：定位航行试验中,AD模型组逃避潜伏期较对照组明显延长(P0.01)；姜黄素组、雷帕霉素组逃避潜伏期较AD模型组缩短(P0.05),姜黄素组和雷帕霉素组之间差异无显著性(P0.05)；空间探索实验中,AD模型组原平台象限游泳时间(路程)/总时间(总路程)的比值明显小于对照组(P0.01)；姜黄素组、雷帕霉素组的上述比值均大于AD模型(P0.05),姜黄素组和雷帕霉素组之间差异无显著性(P0.05) 2.HE染色：对照组海马神经元结构正常；AD模型组海马正常形态神经元数量减少,伴较多凋亡改变；姜黄素组、雷帕霉素组神经元形态基本正常。 3.免疫组化：AD模型组海马内Aβ1-40表达较对照组明显增多(P0.01)；姜黄素组和雷帕霉素组Aβ1-40表达较AD模型组减少(P0.05),姜黄素组和雷帕霉素组之间差异无显著性(P0.05)。 4.电镜检测：对照组海马CA1区神经细胞微结构正常并可见少量自噬体；AD模型组海马CA1区神经元内可见较多自噬体堆积,线粒体肿胀,内质网松散,核膜边界欠清；其余两组中仅见少量自噬体,细胞核和细胞器微结构大致正常。 5.Western Blot测定：对照组、姜黄素组、雷帕霉素组海马中Beclin-1、LC3-Ⅱ表达明显高于AD模型组(P0.05),而对照组、姜黄素组、雷帕霉素组之间差异无显著性(P0.05)。 结论：1.姜黄素和雷帕霉素可改善AD模型大鼠的学习记忆能力,减轻海马结构内神经元损害,对AD模型大鼠具有神经保护作用。 2.通过诱导自噬,增加Beclin-1、LC3-Ⅱ表达,进而减轻Ap负荷,可能是姜黄素和雷帕霉素发挥神经保护作用的机制之一。
【关键词】：阿尔茨海默病 海马结构 自噬 姜黄素 雷帕霉素
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R749.16;R285.5
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 目录9-11
• ~.略词11-12
• 第一章 前言12-15
• 第二章 材料与方法15-24
• 2.1 实验材料15-17
• 2.1.1 实验动物15
• 2.1.2 实验试剂和干预药物15
• 2.1.3 实验器械设备15-16
• 2.1.4 试剂的配置16-17
• 2.2 实验方法17-22
• 2.2.1 动物分组17
• 2.2.2 动物模型建立及干预方法17
• 2.2.3 大鼠学习记忆能力检测17-18
• 2.2.4 取材及组织处理18
• 2.2.5 HE染色18
• 2.2.6 免疫组化测定Aβ_(1-40)表达18-19
• 2.2.7 电镜观察海马组织CA1区神经元自噬19-20
• 2.2.8 Western Blot测定海马中Beclin-1和LC3蛋白表达20-22
• 2.3 结果观察与分析22-23
• 2.3.1 Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力22-23
• 2.3.2 形态学观察23
• 2.3.3 Western Blot检测海马内Beclin-1和LC3蛋白表达23
• 2.4 统计学分析23-24
• 第三章 结果24-32
• 3.1 大鼠学习记忆能力的检测、大鼠体重的变化24-27
• 3.2 HE染色结果观察27
• 3.3 Aβ_(1-40)免疫组化结果观察27-29
• 3.3.1 阳性神经元表达率28
• 3.3.2 平均灰度值分析28-29
• 3.4 海马CA1区神经元自噬的电镜观察29-30
• 3.5 海马内Beclin-1和LC3蛋白表达30-32
• 第四章 讨论32-37
• 4.1 AD模型的建立及姜黄素和雷帕霉素对其学习记忆能力的影响32-33
• 4.2 姜黄素和雷帕霉素对AD大鼠模型Aβ表达的影响33-34
• 4.3 姜黄素和雷帕霉素对AD大鼠模型海马神经元自噬的影响34-36
• 4.4 总结36-37
• 第五章 结论37-38
• 参考文献38-44
• 附图44-48
• 综述48-66
• 参考文献60-66
• 攻读硕士学位期间所发表学术论文目录66-67
• 致谢67

【共引文献】

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本文编号：799121