小鼠白细胞介素33真核表达质粒的构建及表达

发布时间：2017-09-08 15:48

  本文关键词：小鼠白细胞介素33真核表达质粒的构建及表达

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【摘要】：克隆小鼠IL-33基因构建其真核表达质粒,并转染COS-7细胞检测其表达。提取C57BL/6小鼠肺组织总RNA,经反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增小鼠IL-33基因,酶切后插入pc DNATM3.1/myc-His A构建其真核表达质粒pc DNA-3.1-IL-33,重组质粒转染COS-7细胞,RT-PCR和免疫印迹法(western blotting)检测目的基因表达。结果显示,pc DNA3.1-IL-33中插入的片段序列测定结果与小鼠IL-33c DNA序列一致,重组质粒转染COS-7细胞后检测到相应mRNA及蛋白表达。成功克隆了小鼠IL-33基因c DNA,并构建其真核表达质粒。
【作者单位】： 中国医科大学基础医学院免疫学教研室;辽宁大学生命科学院;
【关键词】： 白细胞介素 基因克隆 表达质粒构建 真核表达
【基金】：辽宁省科学计划项目(2011415052-1)
【分类号】：R392;Q78
【正文快照】： 白细胞介素-33(IL-33)是2005年发现的细胞因子,为IL-1类细胞因子超家族成员,广泛存在于多种组织细胞中,是炎症反应的重要调节因子之一[1-2]。目前认为IL-33具有双重生物学功能,即在正常状态下存在于细胞核中,作为转录抑制因子发挥作用[3];细胞损伤时释放到胞外成为一种免疫系

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