肺炎克雷伯菌嗜铁素基因携带情况与其感染A549细胞时NGAL的表达研究

发布时间：2017-09-09 13:11

  本文关键词：肺炎克雷伯菌嗜铁素基因携带情况与其感染A549细胞时NGAL的表达研究

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【摘要】：第一部分肺炎克雷伯菌嗜铁素基因携带情况分析 目的：研究重庆医科大学附属儿童医院临床分离的肺炎克雷伯菌株携带嗜铁素基因的情况。 方法：随机选取从我院临床住院患者中分离的肺炎克雷伯菌株34株(血液13株,痰液21株)，采用PCR法检测菌株嗜铁素基因的携带情况。 结果：34株菌株中，所有菌株均携带肠菌素（Ent）基因entB，9株（26.5%）携带耶尔森菌素（Ybt）基因fyuA，3株（8.8%）携带沙门菌素——糖基化肠菌素(Gly-Ent)基因iroN，1株（2.9%）携带产气菌素（Aer)基因iutA；所有菌株中，只含有Ent一种嗜铁素基因的25株（73.5%），，同时含有其他非Ent嗜铁素基因的9株（26.5%），其中entB、fyuA均阳性者6株（17.6%），entB、ybtS及iroN均阳性者2株（5.9%），4种基因均阳性者1株（2.9%）。 结论：我院临床分离的肺炎克雷伯菌携带的嗜铁素基因以Ent基因为主，非Ent嗜铁素基因的检出需引起注意。 第二部分肺炎克雷伯菌感染A549细胞时活性氧的产生上调NGAL的表达 目的：研究肺炎克雷伯菌(KP)感染A549细胞时，活性氧（ROS）的产生对A549细胞天然免疫蛋白——中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)表达的影响。 方法：将A549细胞株分5组进行实验：正常对照组，H_2O_2组，H_2O_2+维生素E（VE）组，KP组，KP+VE组。采用鲁米诺化学发光法检测各组活性氧水平；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测A549细胞NGAL mRNA的表达；Western-blot检测A549细胞NGAL蛋白的表达。 结果：KP组与阳性对照H_2O_2组ROS水平均较正常对照组升高，同时，两组A549细胞NGAL mRNA及蛋白质的表达也较对照组升高，而两组在加入抗氧化剂VE后，ROS水平都降低，相应的，两组A549细胞NGAL mRNA及蛋白质的表达也下降。 结论：肺炎克雷伯菌感染呼吸道A549细胞时，ROS的产生上调A549细胞天然免疫蛋白NGAL的表达。
【关键词】：肺炎克雷伯菌 嗜铁素 基因型 活性氧 NGAL A549细胞 肺炎克雷伯菌
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R378.996
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-12
• 第一部分 肺炎克雷伯菌嗜铁素基因携带情况分析12-24
• 前言12-13
• 1 材料和方法13-15
• 2 结果15-20
• 3 讨论20-22
• 参考文献22-24
• 第二部分 肺炎克雷伯菌感染 A549 细胞时活性氧的产生上调 NGAL 的表达24-34
• 前言24
• 1 材料与方法24-28
• 2 结果28-30
• 3 讨论30-32
• 参考文献32-34
• 结论34-35
• 文献综述35-44
• 参考文献41-44
• 致谢44-45
• 攻读学位期间的研究成果及发表的学术论文目录45-46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 王伟,肖明;微生物嗜铁素介导的铁摄取[J];生物学杂志;2005年04期

2 王爽;朱道银;帖儒修;李娜;王瑜伟;;鼠抑铁素2蛋白的原核表达及鉴定[J];中国生物制品学杂志;2008年08期

本文编号：820624