瞬时感受器电位通道vanilloid 4在机械牵张人脑微血管内皮细胞中对内皮型一氧化氮合酶的作用

发布时间：2017-09-09 18:18

  本文关键词：瞬时感受器电位通道vanilloid 4在机械牵张人脑微血管内皮细胞中对内皮型一氧化氮合酶的作用

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【摘要】：目的:筛选人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)中瞬时感受器电位(transient receptor potential,TRP)通道亚型,检测该通道亚型在机械牵张刺激中对内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)蛋白表达的影响及探讨相关机制。方法:荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)、Western印迹及细胞免疫荧光筛选HBMEC上TRP通道亚型。根据筛选的TRP通道亚型将细胞分组,应用多功能小型生物撞击机给予机械牵张刺激;流式细胞仪检测细胞牵张前后胞内Ca2+荧光强度变化;Western印迹检测e NOS蛋白表达情况。结果:q RT-PCR结果表明:TRPV4及TRPC1的m RNA相对表达量较多;细胞免疫荧光及Western印迹显示TRPV4通道蛋白表达;流式细胞仪检测结果显示,特异性TRPV4通道抑制组较单纯牵张组Ca2+相对浓度低(P0.001),较未牵张组(P=0.072)、非特异性TRP通道抑制组(P=0.308)无明显差异。Western印迹检测结果显示:TRPV4通道抑制组和内皮型一氧化氮合酶抑制组e NOS蛋白表达水平较单纯牵张组明显降低(P0.05),较未牵张组无明显差异(P0.05)。结论:TRPV4在HBMEC上有表达,机械牵张将其激活后,可以引起e NOS蛋白表达增多,其机制可能与胞外Ca2+的内流有关。
【作者单位】： 重庆医科大学附属第一医院神经外科;
【关键词】： TRPV 机械牵张刺激 内皮型一氧化氮合酶
【基金】：国家临床重点专科建设项目(财社[2011]170号) 重庆市科委自然科学基金(cstc2013jcyj A10079)~~
【分类号】：R363
【正文快照】： 第一作者(First author):蒲九君,Email:346909502@qq.com一氧化氮(nitric oxide,NO)影响下丘脑抗利尿激素(antidiuretic hormone,ADH)分泌是鞍区术后水盐代谢紊乱常见的原因之一[1-2]。而前期对人脑微血管内皮细胞(human brain microvascularendothelial cel l s,H BMEC)的研

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本文编号：822010