体外传代对人脐带间充质干细胞生物学特性的影响

发布时间：2017-09-12 11:03

  本文关键词：体外传代对人脐带间充质干细胞生物学特性的影响

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【摘要】：目的:观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)体外长期传代扩增后形态表型、增殖及分化特性的变化。方法:分别以双酶消化及组织块法分离培养h UCMSCs;细胞传至18代(P18),观察细胞形态、生长曲线、克隆形成、细胞周期、干细胞表型、多向分化能力的变化,全面评测连续传代对h UCMSCs生物学特性的影响。结果:双酶消化结合组织块法可高效分离获得大量h UCMSCs,细胞稳定传代并保持间充质干细胞特性;早期细胞多呈长梭形或纺锤形,至P18时呈多角不定型且细胞体积变大,胞浆增加明显。传代至P18后,h UCMSCs的群体倍增时间增加至60 h以上,绝大多数细胞处于G0/G1期,且成纤维细胞集落形成单位(colony-forming unit-fibroblast,CFU-F)形成降低,克隆集落减小。h UCMSCs可表达且不因持续传代丢失间充质干细胞标记,但仅早期传代细胞表达多能干细胞标记Oct-4及SSEA-4。特异性染色及相关基因表达检测提示P18 h UCMSCs的成脂肪、成软骨及成骨诱导分化能力较早期传代细胞减弱。结论:h UCMSCs是具备高增殖活性和多向分化特性的间充质干细胞群,体外长期传代扩增的h UCMSCs呈现一定的复制性衰老趋势,但不会丢失干性,可稳定表达间充质干细胞特异性表面标记并保持分化活性。
【作者单位】： 西安交通大学医学院附属口腔医院正畸科;第四军医大学口腔医院组织工程研究中心军事口腔医学国家重点实验室;
【关键词】： 人脐带间充质干细胞 体外传代 增殖 分化
【基金】：陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项计划(2008ZDKG-65) 军事口腔医学国家重点实验室开放课题(2014KB06)
【分类号】：R329
【正文快照】： 基于干细胞的组织工程和再生医学可能成为修复损伤和疾病组织的革命性医疗手段[1],而间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在人体中分布广泛,其中人胎儿脐带来源的MSCs(human um-bilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCM-SCs)被认为是具备更高可塑性和更低免

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