颅骨钻孔法在SSST大鼠模型的应用及评价

发布时间：2017-09-13 10:26

  本文关键词：颅骨钻孔法在SSST大鼠模型的应用及评价

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【摘要】：目的 观察颅骨钻孔法在SSST大鼠模型中的应用，通过了解CNS中的脑红蛋白、Caspase-3的表达情况，与其他两种方法比较进行评价，从而探讨一种成功稳定、易于复制、对大鼠脑损伤程度轻的SSST大鼠模型。为后续的研究开发提供实验模型。 方法 采用SD大鼠63只根据完全随机原则每组21只分为：开颅后于上矢状窦中后1/3内注入Activated Cephaloplastin Reagent（A组），开颅后结扎上矢状窦中后1/3及回流静脉加注入Activated Cephaloplastin Reagent（B组），颅骨钻孔于上矢状窦中后1/3内注入Activated Cephaloplastin Reagent（C组），其中A组分为A1（8h）、A2（24h）、A3（72h）三个亚组，B组分为B1（8h）、B2（24h）、B3（72h）三个亚组，C组分为C1（8h）、C2（24h）、C3（72h）三个亚组,造模成功后，分别于8h、24h、72h对大鼠进行神经功能评分、处死、固定、取材；尼氏染色、HE染色观察其细胞形态；免疫组化检测脑红蛋白和caspase-3的表达。 结果 1．三组模型神经功能缺损程度评分结果：三组模型在三个时间点的差异，经单因素方差分析，结果都有统计学意义（P=0.001，F=10.520）、（P=0.000，F=12.229）、（P=0.001，F=11.641），说明三组模型的神经功能缺损程度随着时间呈递增趋势。A、B、C三组模型之间的神经功能缺损程度的评分的差异，结果在8小时、24小时、72小时均有统计学意义，三组之间经两两比较，其中B组与A组之间具有差异（P0.05），B组与C组有差异（P0.05），但A组与C组比较无差异（P0.05），以B组的缺损程度最大； 2.脑组织水含量测定：三组模型在三个时间点的差异，经单因素方差分析，结果都有统计学意义（P=0.003，F=8.425）、（P=0.000，F=16.740）、（P=0.002，F=9.129），说明三组模型的窦旁脑组织水含量于术后8小时组窦旁脑组织水含量增加，24小时组窦旁脑组织水含量进一步升高,72小时组窦旁脑组织水含量达到高峰全脑出现水肿。A、B、C三组模型之间的窦旁脑组织水含量的差异，结果在8小时、24小时、72小时均有统计学意义，三组之间经两两比较，其中B组与A组之间具有差异（P0.05），B组与C组有差异（P0.05），但A组与C组比较无差异（P0.05），以B组的脑组织水含量最显著； 3.脑组织切片HE染色显示：三组模型HE染色显示8小时、24小时组脑组织水肿明显,神经元变性,表现为核固缩,部分细胞致密、深染,突起消失,血管间隙增宽,可见血管扩张。72小时组可见神经元稀少，细胞间距增大,大片神经细胞变性坏死，可见红细胞渗出多； 4.脑组织切片尼氏染色显示：三组模型尼氏染色表现为深蓝色颗粒或斑块状(形如虎斑)的尼氏体数量由8小时组至72小时组逐渐减少,细胞核为蓝色,染色背景为淡蓝色； 5.Caspase-3免疫组化染色：三组模型在三个时间点的差异，，经单因素方差分析，结果都有统计学意义（P=0.000，F=164.671）、（P=0.000，F=34.760）、（P=0.000，F=71.523），说明三组模型脑组织Caspase-3的表达于术后8小时组Caspase-3阳性细胞数增加；24小时组Caspase-3阳性细胞数达峰值；72小时组Caspase-3阳性细胞数缓慢下降，较24小时组减少但较8小时组增加。A、B、C三组模型之间脑组织Caspase-3表达的差异，结果在8小时、24小时、72小时均有统计学意义，三组之间经两两比较，其中B组与A组之间具有差异（P0.05），B组与C组有差异（P0.05），但A组与C组比较无差异（P0.05），以B组脑组织Caspase-3阳性细胞数最多。 6.脑红蛋白免疫组化染色：三组模型在三个时间点的差异，经单因素方差分析，结果都有统计学意义（P=0.003，F=8.418）、（P=0.000，F=13.689）、（P=0.000，F=22.033），说明三组模型脑组织脑红蛋白的表达随着缺血时间的延长，NGB蛋白免疫反应阳性细胞数呈逐渐减少。A、B、C三组模型之间脑组织脑红蛋白表达的差异，结果在8小时、24小时、72小时均有统计学意义，三组之间经两两比较，其中B组与A组之间具有差异（P0.05），B组与C组有差异（P0.05），但A组与C组比较无差异（P0.05）。 结论 1.颅骨钻孔法制作SSST大鼠模型是一种可行的方法； 2.颅骨钻孔法制作SSST大鼠模型可为探讨脑静脉窦血栓形成的发病机理及病理生理演变提供易于复制的实验模型。
【关键词】：上矢状窦血栓形成 动物模型 Caspase-3 脑红蛋白
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R743.3
【目录】：

• 主要英文缩略语索引4-5
• 摘要5-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 材料与方法13-19
• 结果19-34
• 讨论34-39
• 结论39-40
• 参考文献40-44
• 综述44-49
• 参考文献48-49
• 攻读硕士学位期间发表的论文49-50
• 致谢50

【参考文献】

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1 尹静;张祥建;李俐涛;杨q

本文编号：843167