卡波氏肉瘤相关疱疹病毒ORF65抗体的制备及其特异性检测

发布时间：2017-09-14 16:01

  本文关键词：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒ORF65抗体的制备及其特异性检测

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【摘要】：目的制备高效价卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)病毒ORF65衣壳蛋白抗体并检测其特异性。方法将人工合成的ORF65蛋白抗原肽经弗氏佐剂乳化,在家兔背部、颌下等皮下多点免疫注射,间隔2周免疫,共4次。末次免疫后1周取兔血清,ELISA法检测兔免疫血清抗体IgG抗体水平。进一步采用免疫荧光、Western blot检测制备的抗血清中与ORF65结合的特异性。结果家兔在全程免疫后产生了高效价的特异性抗体,最高滴度达1∶12 800。免疫荧光检测显示,与未经佛波酯(TPA)刺激的BCBL-1细胞相比,兔抗血清主要结合于BCBL-1细胞胞质,与ORF65蛋白在细胞内表达位置一致。Western blot结果显示在21kD处有特异性蛋白条带,其大小与预期的ORF65蛋白大小相符,同时经TPA刺激的BCBL-1细胞中ORF65蛋白表达量高于对照组,与ORF65蛋白裂解期蛋白的特性相符。结论用ORF65衣壳蛋白抗原肽段免疫家兔,可成功制备高效价的特异性抗血清,该抗体可与KSHV病毒ORF65蛋白特异性结合。
【作者单位】： 右江民族医学院微生物学与免疫学教研室;右江民族医学院;
【关键词】： 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒 ORF 抗体 免疫性
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81071345,81160535) 广西壮族自治区教育厅桂教科研基金资助项目(201204LX324,2013YB183) 广西自然科学基金资助项目(2014GXNSFAA118136)
【分类号】：R392
【正文快照】： 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi′s sarcoma associatedherpesvirus,KSHV)由Chang等[1]在1994年首先从AIDS相关型Kaposi′s肉瘤(Kaposi′s sarcoma,KS)患者的肉瘤组织发现,又称人类8型疱疹病毒(human herpesvirus-8,HHV-8)。KSHV与原发性弥漫性淋巴瘤(primary effusion lympho

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本文编号：850933